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党参化学成分及其体外抗氧化活性分析

日期: 2019/10/7 浏览: 4 来源: 学海网收集整理 作者: 泰州市中医院 殷生楠 泰州市人民医院 李秀芹

【摘要】目的:围绕党参化学成分及其体外抗氧化活性予以相应分析。方法:测定党参中各化学成分,利用公式计算其各成分对O2-自由基清除能力。结果:党参中含有7R/7S,8S-guaiacylglycerol -8-O-4’-(coniferyl alcohol) ether、党参炔苷、苍术内脂III、紫丁香苷、党参苷I、党参吡咯烷鎓B等七种化合物,其中苍术内脂III对O2-自由基清除能力最强。结论:党参中含有七种化合物,其中苍术内脂III对O2-自由基清除能力最强。
   【关键词】:党参;化学成分;体外抗氧化活性
  
   党参即桔梗科植物党参[Codonopsis pilosula(Franch.) Nannf.]、素 花 党 参 Codonopsis pilosula Nannf. var. modesta (Nannf.) L. T. Shen或川党参Codonopisis tangshen Oliv.的根部(干燥),又称为黄参、上党参、中灵草等,是祖国传统医学中常用药材之一。本文将围绕党参化学成分及其体外抗氧化活性予以相应分析,以期为今后临床应用党参治疗各类疾病提供专业性的药学理论依据,现总结如下。
   1 资料与方法
   1.1 一般资料
   1.1.1 仪器及试剂 ①仪器:上海科哲生化科技有限公司提供薄层色谱摄影仪(型号:GoodSee-I)、提供上海博讯实业有限公司医疗设备厂提供数显鼓风干燥箱(型号:GZX-9240 MBE)、瑞士梅特勒-托利多(METTLER TOLEDO)仪器(中国)有限公司提供电子天平、上海安亭科技仪器厂提供台式离心机(型号:TDL-802B)、德国 Bruker 公司提供窄腔液体核磁共振波谱仪(型号:AVANCE III 400 MHz)、美国沃特世公司(waters)提供质谱仪(型号:ZQ-2000)、美国Thermo Scientific公式提供酶标仪(型号:Varioskan Flash)、法国Bio-Logic公司提供圆二色光谱仪(型号:MOS-500),以及本次试验所需各类硅胶、层析板、吸附树脂、氘代试剂、羟丙基葡聚糖凝胶等;②试剂:蒸馏水、分析纯。
   1.1.2 材料 党参由本地药材市场采购,供应商为贵州仙龙药业有限公司。
   1.2 方法
   1.2.1 提取分离化合物 准确称量10000g党参后研磨,过60目筛后加10倍甲醇行2次超声提取(1h/次),提取液减压浓缩获得1000浸膏(深棕色)。浸膏经水溶解并加乙酸己酯(等体积)行3次萃取,合并萃取液并行减压浓缩。水部位经吸附树脂柱一次用水及30%、50%、70%、95%乙醇洗脱,收集洗脱液行减压浓缩,薄层色谱法检测。70%乙醇洗脱部分经反复硅胶柱色谱分离、二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得化合物3。50%乙醇洗脱部分经ODS反相柱色谱甲醇梯度洗脱(甲醇浓度30%、50%、70%、100%),成分相似洗脱液合并检测获得三组分,行硅胶柱色谱分离后分别经二氯甲烷-甲醇梯度洗脱获得化合物1、化合物2混合物。30%乙醇洗脱部分经甲醇梯度洗脱及减压浓缩且分3组分,其中1组分经薄层色谱法测得化合物7;1组分经乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱及薄层色谱法测得相似洗脱液合并,经硅胶柱色谱分离、二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得化合物5;1组分经反复硅胶柱色谱分离、二氯甲烷-甲醇梯度洗脱,薄层色谱法测得相似成分物质合并后呈单一斑点,减压回收获得化合物6。乙酸己酯萃取部位溶于乙酸乙酯(适量)中行硅胶拌样,硅胶色谱柱梯度洗脱(依次为环己烷-乙酸己酯、二氯甲烷-甲醇),薄层色谱法检测合并相似洗脱液、减压回收后获得2个组分,其中1组分经薄层色谱、硅胶柱色谱分离得化合物4。超氧负离子(O2-)清除率=[(1–A1/A2)/A0]×100%,其中A0为 Tris-HCl缓冲液4.5 ml+无水乙醇1ml+邻苯三酚0.4ml+HCl溶液1ml的化合物样品519nm波长处的定的吸光度,A1为Tris-HCl缓冲液4.5 ml+样品溶液1ml+邻苯三酚0.4ml+HCl溶液1ml的A,A2为 Tris-HCl 缓冲液4.5ml+样品溶液1ml+水0.4ml+HCl溶液1mL的A。
   2 结果
   本次试验测得化合物1-7共7种,其中化合物1、化合物2混合物为淡黄色粉末,推测可能为7R/7S,8S-guaiacylglycerol -8-O-4’-(coniferyl alcohol) ether;化合物3为浅黄色油状物,经分析可知为党参炔苷;化合物4为白色针晶,经分析可知为苍术内脂III;化合物5为白色粉末,经分析可知为紫丁香苷;化合物6为白色粉末,经分析可知为党参苷I;化合物7为白色粉末,经分析可知为党参吡咯烷鎓B。
   对党参中7种化合物抗氧化活性分析可知,化合物4(苍术内脂III)对O2-自由基清除能力显著高于其他化合物,具体如图1。
  

党参化学成分及其体外抗氧化活性分析

   质量浓度/g·L
   图1 化合物1-7对O2-自由基清除能力分析
   3 讨论
   党参性平、味甘、微酸,属于多年生无毒草本植物[1],主要产地包括陕西、山西、甘肃等,具有健脾益气、补中益肺之功效,临床多用于治疗脾胃虚弱、脾肺气虚、热病伤津、中气不足等病因所致各类疾病[2]。《本草正义》描述: “党参力能补脾养胃,润肺生津,健运中气,本与人参不甚相远。其尤可贵者,则健脾运而不燥,滋胃阴而不湿,润肺而不犯寒凉,养血而不偏滋腻,鼓舞清阳,振动中气而无刚燥之弊。......尤为得中和之正”[3]。现代药理学研究可知[4],党参具有增强机体免疫力、调节血糖、调节胃收缩、耐疲劳、降压、延缓衰老、抗溃疡、抗缺氧、促进造血机能等作用。
   本文通过对党参中化合物分析可知,测得党参中含有7R/7S,8S-guaiacylglycerol -8-O-4’-(coniferyl alcohol) ether、党参炔苷、苍术内脂III、紫丁香苷、党参苷I、党参吡咯烷鎓B等七种化合物,其中苍术内脂III对O2-自由基清除能力显著高于其他化合物。但应注意的是,上述7种党参中含有的化合物是否参与其传统疾病治疗功效尚不得而知,由于本文篇幅有限,因此未对7种化合物其他抗氧化活性能力予以相应测定,提示还需在今后实际工作中深入研究。
   综上,党参中含有七种化合物,其中苍术内脂III对O2-自由基清除能力最强,值得今后实际工作中加以参考。
  
   参考文献
   [1]孙政华,邵晶,郭玫.党参化学成分及药理作用研究进展[J]. 安徽农业科学,2015,43(33): 174-176.
   [2]冯亚静,王晓霞,庄鹏宇,等.党参的化学成分研究[J]. 中国中药杂志,2017,42(1): 135-139.
   [3]俞星,韩春姬,朴惠善,等.党参皂苷 D对 HepG-2细胞增殖时间效应和细胞周期的影响[J].吉林大学学报:医学版, 2012, 38(2): 236-239.
   [4]冯佩佩,李忠祥,原忠.党参属药用植物化学成分和药理研究进展[J]. 沈阳药科大学学报, 2012, 29(4): 307-311.

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