学海网

硕士论文-猪附红细胞体生物学特性的研究及间接ELISA方法的建立，共59页，30071字
中 文 摘要
本试验探讨了影响猪附红细胞体的感染率的因素，并以 RPMI-1640 作为基础培养
基，对分离的猪附红细胞体进行体外培养，并获得成功。将体外培养成功的附红细胞
体，经过分离提纯，测得膜蛋白有 4 条主蛋白带，另外还有 2 条次等蛋白带。经过处
理的猪附红细胞体作为包被抗原，对猪附红细胞体间接 ELISA 各项反应条件进行了摸
索，确定了最适工作浓度。研究结果表明：猪附红细胞体在以 RPMI-1640 为基础培养
液的完全培养基中生长良好；附红细胞体抗原最佳包被浓度为 38.75ug/ml，血清最
佳稀释度为 1：80，血清反应时间为 1 小时，封闭液选择 1%BSA 封闭 1 小时，酶标二
抗最佳稀释度为 1：3200，底物反应时间确定为 15min。阴阳性临界值为 0.33。与 HCV、
PRRSV 和大肠杆菌的标准阳性血清呈阴性反应，与猪附红细胞体标准阳性血清呈阳性
反应，证明该方法具有良好特异性。ELISA 方法与常规镜检方法相比较，其灵敏度是
镜检 1.76 倍，证明 ELISA 作为诊断猪附红细胞体的一种方法具有灵敏、快速的优点，
适合大规模养殖场对附红细胞体病的调查，从整体水平上把握该病的流行情况，为控
制该病的传播提供依据。
关键词：猪附红细胞体
体外培养
生物学特性
间接 ELISA
目录
符号说明……………1
前言…………………2
中文摘要……………4
英文摘要……………5
第一章文献综述………6
病原学研究…6
流行规律……10
致病机理……11
临床症状……12
剖解变化……13
诊断技术研究13
防制…………16
第二章实验研究……17
实验一 附红细胞体生物学特性研究……17
材料…………17
方法…………21
结果…………25
讨论…………30
实验二 猪附红细胞体间接 ELISA 方法的建立………………33
材料…………33
方法…………34
结果…………36
讨论…………44
实验三 血清学调查…45
第三章 结论…………46
附 图…47
参考文献……………49
致 谢…55