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硕士论文-樟芝菌生物学特性研究，共101页，46923字
摘要
本研究以樟芝菌丝体（Antrodia camphorata Zang＆Su）为材料，从环境条件、营
养条件和菌丝体及分生孢子形态显微观察三个方面对其生物学特性进行了初步研究。
试验结果表明：
1、环境条件对樟芝菌丝体生长的影响
樟芝菌丝体的萌发温度范围为 6℃～34℃，菌丝体生长的适宜温度范围为 24℃～
32℃，生长最适温度为 30℃；3℃～5℃是樟芝菌种保藏的适宜温度；35℃是樟芝菌
丝体能够耐受的最高温度。
樟芝菌丝体固体发酵培养基质的适宜含水量范围是：40％～60％，最适含水量在
55％左右。
在樟芝菌丝体生长过程中，适量的给予光照，能够加速菌丝体的生长，但当光照
强度大于 600Lx 时，能够抑制菌丝体的生长；蓝光对樟芝菌丝体的生长有一定的抑制
作用；光照对于樟芝菌丝体密度及颜色的影响非常显著，黑暗条件下，菌丝体呈深橘
红色，生长浓密；光照强度小于 82Lx 时，菌丝体颜色略浅，但当光照强度超过 160Lx
时，菌丝体颜色明显变浅，菌落稀疏。
适宜樟芝菌丝体生长的 pH 范围是 pH5～pH7，最适酸碱度是 pH6；在培养基中添
加 KH2PO4后，由于其对培养基 pH 的缓冲作用，有利于樟芝菌丝体的生长。
液体深层培养条件下，合适的装瓶量是 500mL 摇瓶装液量 100mL；适宜的接种
量是 7.5%。
2、营养条件对樟芝菌丝体生长的影响
樟芝菌丝体生长的最适碳源是葡萄糖和马铃薯淀粉；最适氮源是酵母膏；液体深
层培养条件下，最佳碳氮比（摩尔比）是 30:1～48:1；KH2PO4和 MgSO4.7H2O 是促进樟
芝菌丝体生长的两种无机盐，适宜添加量分别为 0.1%和 0.05%；微量生长因子对樟芝
菌丝体的生长有明显的促进作用，肌醇和 VB1 效果比较明显；大麦和谷子是适宜樟芝
固体发酵的两种培养基质。
通过对初步筛选出的营养因子进行正交试验，筛选出适宜樟芝菌丝体生长的培养
基培方是：马铃薯淀粉 1％，葡萄糖 2％，酵母膏 0.1％，蛋白胨 0.1％，麸皮 1％，
KH2PO4 0.1％，MgSO4.7H2O 0.05％，（琼脂 2%）。
通过对樟芝菌丝体液体培养生长曲线的测定发现，樟芝菌丝体在培养 2d 以内处
在停滞期，2～6d 为快速生长的对数生长期，菌丝体干重快速提高，到达第 7d 后进
入稳定期，培养 10d 后逐步进入衰亡期。
3、樟芝菌丝体及分生孢子形态显微观察
通过对樟芝菌丝体及分生孢子进行 ESEM 观察，发现其有初生菌丝和次生菌丝存
在，初生菌丝壁薄，透明，胞径 2.5μm～4.5μm；次生菌丝薄壁、透明微黄，具锁状
联合，有分枝，胞径 2.16μm～3.55μm。
樟芝菌丝体在平板培养阶段能够产生分生孢子。分生孢子淡橘红色，椭圆形，外
壁光滑，胞径 1.9μm～3.5μm×4.0μm～6.0μm。
另外，在 ESEM 图片中还发现形态与典型的担子及担孢子形态相似的结构。
关键词：樟芝
菌丝体
生物学特性
目录
中文摘要ⅰ
英文摘要ⅲ
目录····ⅴ
第一章 文献综述·····1
研究的目的和意义··········1
国内外研究进展2
2.1 樟芝的分类地位··········3
2.2 樟芝生物学特性的研究····3
2.2.1 分布与寄主···········3
2.2.2 形态特征·3
2.2.3 环境条件及营养条件···4
2.3 樟芝的生理活性成分研究··4
2.4 樟芝的药理作用研究······5
2.5 樟芝产品的开发··········6
第二章 环境条件对樟芝菌丝生长的影响··········7
前言·7
1 材料与方法·····7
1.1 供试菌株···7
1.2 培养基配方·7
1.2.1 斜面母种培养基·····7
1.2.2 活化平板菌种培养基·7
1.2.3 活化液体菌种培养基·7
1.2.4 基础培养基·········7
1.3 主要仪器···7
1.4 培养及观测方法·········8
1.4.1 平板培养···········8
1.4.2 液体深层培养·······8
1.4.3 平板培养性状观测···8
1.4.4 发酵液 pH 测定······8
1.4.5 菌丝体干重测定·····8
1.4.6 液体深层培养性状观察···········8
1.5 试验设置····8
1.5.1 温度对樟芝菌丝体生长的影响······8
1.5.2 培养基质含水量对樟芝菌丝体生长的影响········9
1.5.2.1 试验所用培养基质及制作······9
1.5.2.2 试验方法········9
1.5.3 光照对樟芝菌丝体生长的影响······9
1.5.4 起始 pH 对樟芝菌丝体生长的影响···9
1.5.4.1 平板培养·········9
1.5.4.2 液体深层培养····9
1.5.5 KH2PO4 对不同起始 pH 条件下樟芝菌丝体生长的影响·········10
1.5.5.1 平板培养········10
1.5.5.2 液体深层培养···10
1.5.6 装瓶量对樟芝菌丝体液体深层培养的影响········10
1.5.7 接种量对樟芝菌丝体液体深层培养的影响········10
2 结果与分析······10
温度对樟芝菌丝体生长的影响·········10
2.1.1 菌种适宜保藏温度试验···········10
2.1.2 菌丝体耐热温度试验·10
2.1.3 菌丝体适宜生长温度试验·········10
培养基质含水量对樟芝菌丝体生长的影响···········13
光照对樟芝菌丝体生长的影响·········14
2.4 起始 pH 对樟芝菌丝体生长的影响······16
2.4.1 平板培养试验··········16
2.4.2 液体深层培养试验·····18
2.5
KH2PO4 对不同起始 pH 条件下，樟芝菌丝体生长的影响··········19
2.5.1 平板培养试验·········19
2.5.2 液体深层培养试验····21
2.6
2.7
装瓶量对樟芝菌丝体液体深层培养的影响··········23
接种量对樟芝菌丝体液体深层培养的影响··········25
第三章 营养条件对樟芝菌丝体生长的影响········27
前言 ·27
1
材料与方法····27
1.1
1.2
供试菌株···27
培养基配方·27
1.2.1 斜面母种培养基······27
1.2.2 活化平板菌种培养基··27
1.2.3 活化液体菌种培养基··27
1.2.4 基础培养基··········27
1.3
1.4
主要仪器···27
培养条件及观测方法·····28
1.4.1 固体平板培养·········28
1.4.2 液体深层培养·········28
1.4.3 发酵液 pH 测定········28
1.4.4 发酵液多糖含量测定···28
1.4.5 发酵液蛋白质含量测定·28
1.4.6 菌丝体干重测定·······28
1.4.7 液体深层培养性状观察·28
1.5 试验设置····28
1.5.1 不同碳源对樟芝菌丝体生长的影响····28
1.5.1.1 平板培养········28
1.5.1.2 液体深层培养···29
1.5.2 不同氮源对樟芝菌丝体生长的影响····29
1.5.2.1 平板培养·········29
1.5.2.2 液体深层培养····29
1.5.3 不同碳氮比对樟芝菌丝体生长的影响··29
1.5.3.1 平板培养·······29
1.5.3.2 液体深层培养···29
1.5.4 无机盐对樟芝菌丝体生长的影响·····29
1.5.4.1 平板培养·······29
1.5.4.2 液体深层培养···29
1.5.5 生长因子对樟芝菌丝体生长的影响···29
1.5.5.1 平板培养·······30
1.5.5.2 液体深层培养···30
1.5.6 固体培养基质筛选试验30
1.5.7 正交试验法筛选樟芝菌丝体适宜培养基··········30
1.5.7.1 平板培养·······30
1.5.7.2 液体深层培养···31
1.5.8 樟芝菌丝体液体深层培养生长曲线测定试验·······31
2结果与分析·····31
2.1
不同碳源对樟芝菌丝体生长的影响·····31
2.1.1 平板培养试验·········31
2.1.2 液体深层培养试验·····33
2.2
不同氮源对樟芝菌丝体生长的影响·····35
2.2.1 平板培养试验·········35
2.2.2 液体深层培养试验·····37
2.3
不同碳氮比对樟芝菌丝体生长的影响···38
2.3.1 平板培养试验·········39
2.3.2 液体深层培养试验·····40
2.4
无机盐对樟芝菌丝体生长的影响·······42
2.4.1 平板培养试验·········42
2.4.2 液体深层培养试验·····44
2.5
生长因子对樟芝菌丝体生长的影响·····46
2.5.1 平板培养试验··········46
2.5.2 液体深层培养试验·····47
固体培养基质筛选试验···49
正交试验法筛选樟芝菌丝体适宜培养基·50
2.7.1 培养性状观测·········50
2.7.1.1 发酵液 pH 变化情况··········50
2.7.1.2 固体平板培养和液体深层培养性状观察·····52
2.7.2 正交试验结果分析·····54
2.8
樟芝菌丝体液体深层培养生长曲线测定·59
第四章 樟芝菌丝体及分生孢子形态显微观察······62
前言·62
材料与方法····62
1.1 供试菌株····62
1.2 主要仪器····62
1.3 试验方法····62
1.3.1 光学显微镜观察······62
1.3.2 环境扫描电子显微镜观察··········63
结果与分析····63
2.1 菌丝体形态观察··········63
2.2 分生孢子及产孢结构形态观察··········63
2.3 含锁状联合的生殖菌丝形态观察········64
第五章
1
结论与讨论···65
结论··········65
1.1 环境条件对樟芝菌丝体生长的影响······65
1.2 营养条件对樟芝菌丝体生长的影响······65
1.3 樟芝菌丝体及分生孢子形态观察········66
2
讨论··········67
2.1 关于试验结果67
2.2 试验材料方面的问题······67
2.3 本研究的未尽事宜和不足之处··········67
2.4 进一步研究的方法和建议··68
参考文献·69
附 图····74
致 谢····87