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硕士论文-桑黄菌生物学特性研究，共76页，29969字
摘 要
本文以开发利用桑黄这一新兴的药用菌物资源，探明其菌丝体生长所需条件（环境条
件、营养条件）和测定几种胞外酶活性为目的，对桑黄的主要生物学特性进行测定，以正
交试验确定了桑黄菌丝体生长所需的最适培养基，为桑黄的活性成分研究、开发新药及人
工栽培桑黄子实体提供了科学依据；通过 DNA 测序技术等技术，确定三种桑黄菌种为火木
层孔菌。主要结果如下：
1.环境条件对桑黄菌丝体的影响
桑黄菌丝体能在 10-34℃的温度条件下生长，菌丝体最适生长温度为 28℃。3-5℃为
菌种保藏最适温度。
在桑黄菌丝体生长过程中，给与适量的光照能促进菌丝体生长，但形成菌落比较稀疏，
颜色较淡，呈绒毛状，而在黑暗条件下形成的菌落，菌丝浓密，颜色较深；当光照大于 600Lx，
光照抑制菌丝生长。
桑黄菌丝生长的最适 pH 为 7。
液体深层培养条件下，最适装瓶量为 500ml 三角瓶装液量 100ml，最适接种量为 10%。
2.营养条件对桑黄菌丝体的影响
通过桑黄菌丝体营养条件单因子筛选试验确定：最适碳源为玉米面和葡萄糖，最适
氮源为酵母膏，最适无机盐为 KH2PO4和 MgSO4?7H2O。单因子正交试验筛选出适宜桑黄菌
丝体生长的培养基为：葡萄糖 3%，酵母膏 0.3%，玉米面 1%，磷酸二氢钾 0.01%，硫酸
镁 0.05%。
3.胞外酶活性测定
桑黄液体深层发酵过程中几种酶进行测定发现，多酚氧化酶和漆酶的活性比较低，
而纤维素酶和蛋白酶的活性较高，在第 7 天左右活性最强。说明桑黄对淀粉类物质、纤
维素类、木质素类物质均具有降解能力。
4.桑黄品种鉴定
三菌株 ITS 片段序列与裂蹄层孔菌 ITS 片段序列同源性最近，ISSR 标记显示三菌
株可能为同一种菌株。通过对子实体和菌丝体显微结构进行观察，证明是火木层孔菌。
关键词：桑黄；菌丝体；发酵；生物学
目录
摘 要 ... 1
Abstract 2
前
言 ..3
1.药用真菌的研究现状 .
2.桑黄简介 ..........
2.1 多糖研究现状 ........
2.2 胞外酶研究现状 ......
2.3 药理作用研究 ........
2.4 人工栽培及发酵技术应用 ..........
研究内容
1.环境条件对桑黄菌丝体的影响 .....
1.1 供试菌株
1.2 培养基配方.......... 9
1.3 主要仪器 9
1.4 培养条件及观测方法.. 9
1.5 试验方法........... 10
2 营养条件对桑黄菌丝体生长的影响 11
2.1 供试菌株........... 11
2.2 培养基配方......... 11
2.3 主要仪器........... 11
2.4 培养条件及观测方法. 11
2.5 试验方法........... 12
3 桑黄四种常见胞外酶活性测定 ....
3.1 供试菌株...........
3.2 培养基配方.........
3.3 主要仪器...........
3.4 试验方法...........
3.2 液体培养...........
3.3 样品制备...........
3.4 酶活力测定.........
3.5 酶活性定义.........
4 几种桑黄菌株品种鉴定 ..........
4.1 材料...
4.2 DNA 提取 ...........
4.3. ISSR 分析 .........
4.4．ITS 测序 ..........
4.5 子实体观察.........
4.6 菌丝体观察.........
结果与分析 .........
1.环境条件对桑黄菌丝体生长的影响
1.1 温度条件对桑黄菌丝体生长的影响 .
1.2 起始 pH 对桑黄菌丝体生长的影响..
1.3 装瓶量对桑黄菌液体深层培养的影响...........
1. 4 接种量对桑黄菌丝体深层发酵影响
1.5 光照对桑黄菌丝体生长的影响.....
2 营养条件对桑黄菌丝体生长的影响
2.1 不同碳源对桑黄菌丝体的影响 .....
2.2 不同氮源对桑黄菌丝体的影响.....
2.3 不同碳氮比筛选试验.
2.4 无机盐对桑黄菌丝体生长的影响...
2.5 正交试验 ...........
3 几种胞外酶活性测定
3.1 桑黄发酵液中纤维素酶活性测定结果...........
3.2 桑黄发酵液中漆酶活性的测定结果.
3.3 多酚氧化酶的活性测定结果.......
3.4 蛋白酶活性的测定结果...........
3.5 讨论...
4 不同桑黄菌株品种鉴定 ..........
4.1 ISSR 标记 ..........
4.2．ITS 测序 ..........
4.3 子实体观察.........
4.4 菌丝体观察.........
4.5 讨论...
结论与讨论 .........
1 环境条件对桑黄菌丝体生长的影响
2 营养条件对桑黄菌丝体的影响 ....
3 胞外酶活性测定....
4 桑黄品种鉴定......
参考文献 ...........
附录 ...
致谢 ...