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硕士论文-桃果实褐变控制技术的研究，共78页，51436字
中文摘要
桃是典型的呼吸跃变型果实，在通常条件下不耐贮藏，容易软化，腐烂，即使在
低温条件下贮藏，也容易绵化或者褐变，甚至丧失风味。中华寿桃是一个晚熟的优良
品种，贮藏的问题之一就是果肉褐变。近来研究发现，SA 能有效抑制果实乙烯的生
物合成和呼吸作用，消除活性氧自由基的伤害而延缓果实成熟衰老。1-MCP 能有效
抑制乙烯生理功能，能延长果实的贮藏期。本研究以期 SA 和 1-MCP 能够抑制果实
褐变，同时，用反义 RNA 技术阻止 PPO 基因的表达，以从根本上抑制果肉褐变。
中华寿桃果实采自本地果园，以其为试材研究 SA 和 1-MCP 对果实褐变和其它
生理作用的影响。试验做以下处理，用不同浓度 SA（1.25mmol/L，2.5mmol/L，
5.0mmol/L）溶液（pH=6.0）室温条件下浸湿 20min；用不同浓度 1-MCP（500nl/L，
1000nl/L，1500nl/L）处理用塑料薄膜密闭的桃果实。各处理果实置于 1±0.5℃，
RH80%~90%贮藏条件下保存。
试验结果表明，SA 和 1-MCP 能够降低果实的呼吸强度和乙烯释放高峰，并能延
迟高峰期到来的时间；同时能够减缓果实可溶性固形物的含量下降速度，相对维持果
实的硬度；与对照相比，SA 和 1-MCP 能降低果实 CAT 和 POD 活性，而提高 SOD
活性，MDA 和超氧阴离子也能保持较低水平。对果实褐变指数的影响 SA 作用效果
优于 1-MCP。
关键词：桃；水杨酸；1-甲基环丙烯；成熟；衰老；褐变；乙烯
目录
致谢………………Ⅰ
中文摘要…………Ⅱ
英文摘要…………Ⅲ
缩略词表…………Ⅳ
前言………………Ⅵ
第一章
文献综述
1. 桃果实采后贮藏生理…………………1
1.1 果实软化生理1
1.1.1 果实软化细胞和亚细胞结构的变化…………………2
1.1.2 果实软化相关酶………………2
1.1.3 植物激素4
1.1.4 贮藏条件6
1.2 呼吸代谢生理7
1.3 冷害胁迫……8
2. 活性氧与保护酶系统…………………9
2.1 活性氧………9
2.1.1 活性氧的产生…………………9
2.1.2 活性氧的作用…………………9
2.2 保护酶……9
2.2.1 保护酶系统……………………9
2.2.2 保护酶的功能…………………10
3. 脂氧合酶与果实成熟衰老……………11
3.1 脂氧合酶与膜脂过氧化…………11
3.1.1 细胞膜透性与组分的变化……11
3.1.2 膜脂过氧化……………………11
3.2 脂氧合酶与乙烯…………………13
3.3 脂氧合酶与茉莉酸和脱落酸……13
4. 果实褐变………14
4.1 果实褐变的酶学研究……………14
4.2 果实褐变的主要影响因素………15
4.2.1 低温……15
4.2.2 气体分压16
4.2.3 果实成熟度……………………16
4.2.4 钙元素缺乏……………………17
5. 果实成熟衰老的调控…………………17
5.1 物理调控…17
5.1.1 热处理…17
5.1.2 温度控制18
5.1.3 湿度调节19
5.1.4 气体调控19
5.2 化学调控…19
5.2.1 SA 调控20
5.2.2 1-MCP 调控……………………22
5.3 基因调控…23
5.3.1 反义RNA技术原理及应用…23
5.3.2 反义RNA对果实成熟衰老的调控……………………24
6. 选题依据及研究内容…………………26
第二章 SA 和 1-MCP 对桃果实衰老褐变的影响
1. 材料与方法……27
1.1 材料………27
1.2 处理………27
1.3 测定方法…27
1.3.1 果实品质指标的测定…………27
1.3.2 果实生理指标的测定…………27
2 结果与分析……31
2.1 SA 和 1-MCP 处理对桃果实硬度的影响…………………31
2.2 SA 和 1-MCP 处理对桃果肉色泽的影响…………………32
2.3 SA 和 1-MCP 处理对桃果实可溶性固形物含量的影响…32
2.4 SA 和 1-MCP 处理对桃果实呼吸强度的影响……………33
2.5 SA 和 1-MCP 处理对桃果实乙烯释放的影响……………34
2.6 SA 和 1-MCP 处理对桃果实保护酶（SOD、POD、CAT）活性的影响……………35
2.6.1 SA和1-MCP处理对SOD活性的影响…………35
2.6.2 SA和1-MCP处理对POD活性的影响…………35
2.6.3 SA和1-MCP处理对 CAT活性的影响…………36
2.7 SA 和 1-MCP 处理对桃果实 PPO 活性的影响……………37
2.8 SA 和 1-MCP 处理对桃果实 LOX 活性的影响……………38
2.9 SA 和 1-MCP 处理对桃果实 H2O2、·O2-、MDA 含量的影响38
2.9.1 SA 和 1-MCP 处理对 H2O2 含量的影响………………38
2.9.2 SA 和 1-MCP 处理对·O2- 的影响 …………………… 39
2.9.3 SA 和 1-MCP 处理对 MDA 含量的影响………………40
2.10 SA和 1-MCP处理对细胞膜透性的影响…………………41
2.11 SA和 1-MCP处理对桃果实褐变指数的影响……………41
3. 讨论……………42
3.1 SA 和 1-MCP 与果实硬度、可溶性固形物含量和果肉色泽的变化……………42
3.2 SA 和 1-MCP 与果实呼吸强度与乙烯释放………………43
3.3 SA 和 1-MCP 与果实保护酶系统…43
3.4 SA 和 1-MCP 与果实 PPO 活性的变化……………………44
3.5 SA 和 1-MCP 与膜脂过氧化………44
3.6 SA 和 1-MCP 与 H2O2、·O2-、MDA 的生成及细胞膜透性…45
3.7 SA 和 1-MCP 与果实褐变…………45
第三章
PPO 基因控制
1. 材料与方法……47
1.1 材料………47
1.2 酶与试剂…47
1.3 仪器………47
2. 方法……………47
2.1 制板………47
2.2 大肠杆菌感受态细胞（XLⅠ-Blue）的制备………………47
2.3 热激转化和阳性克隆筛选………48
2.4 质粒 DNA 的提取…………………48
2.5 酶切………49
2.6 电泳………49
2.7 回收目的 DNA 片断………………50
2.8 突出末端的修饰…………………50
2.9 CIP 去磷酸化51
2.10 PEG8000 处理……………………51
2.11 连接反应…51
3. 结果……………51
3.1 目的基因片段同源性分析…………52
3.2 质粒 DNA 的电泳和酶切…………52
3.3 表达载体酶切结果………………53
4. 讨论……………54
结论与展望………55