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  • 资源分类:生物农医
  • 适用专业:动物遗传育种与繁殖
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资料简介
硕士论文-寿光鸡胚胎原始生殖细胞迁移与分布观察,共48页,28183字
摘 要
本研究旨在观察和分析寿光鸡早期胚胎各发育时期原始生殖细胞(PGCs)的形态、
迁移和分布情况,为寿光鸡遗传资源的保存、生殖腺嵌合体以及转基因鸡的构建奠定理
论和实践基础。本研究用常规石蜡切片,经PAS单一染色、PAS-苏木精复染或苏木精-
伊红(HE)复染,对孵化1至8天的各期鸡胚PGCs的形态、迁移和分布进行了系统的观
察。结果如下:
1.PGCs形态学特点
生殖新月区 PGCs 呈不规整的圆形或椭圆形,细胞核为圆形或卵圆形,偏于细胞一
侧。细胞质内含大量的糖原。细胞直径为 10~22.5μm,长轴为 15~22.5μm,短轴为 10~
15μm,直径平均为 11.8±2.69×16.5±1.97μm。细胞核直径平均为 7.5±0.6μm。
血液 PGCs 呈圆形,细胞核呈圆形,偏于细胞一侧。糖原颗粒相比生殖新月期减少。
细胞直径为 10~12.5μm,平均为 11.5±1.2μm,细胞核直径平均为 7.5±0.6μm。
性腺 PGCs 呈圆形或卵圆形,有伪足,其胞核呈圆形或椭圆形,偏向细胞的边缘。
胞质着色很淡,糖原颗粒更加减少。细胞直径为 10~15μm,平均直径为 12.75±1.46μm,
细胞核直径平均为 7.5±0.6μm。
2.PGCs分布特点
孵化 19~22 h(5 期)胚胎,PGCs 主要聚集于生殖新月区;孵化 29~33h(9 期)
胚胎,PGCs 分布在胚盘明区血管中;孵化 40~45h (11 期)首次在胚体的卵黄静脉入口
处和头部观察到 PGCs,PGCs 开始进入胚体;孵化 48~55 h(13~15 期)胚胎,PGCs
聚集于胚体的心脏、大血管及头部间充质血管;孵化 72 h(18 期)胚胎,PGCs 大量迁移
至生殖嵴处。孵化 3.5~5d 胚胎,生殖嵴 PGCs 的数量逐渐增多,糖原颗粒逐步减少;
孵化第 6d 胚胎,性腺初具卵巢特征;孵化的第 7d,卵巢或睾丸的分化进一步明显,PGCs
胞质内糖原颗粒基本消失。
这些结果表明,PGCs 在孵化 33h 时已开始从生殖新月区进入卵黄囊血管的迁移;
在孵化 40h 已开始进入胚体;孵化 72h 时已开始迁入生殖嵴,3.5~5d 内是 PGCs 迁移
的最高时期。因此,采集 PGCs 的最佳时期为:孵化 19~22h 生殖新月区,孵化 48~55
h 的血管中和孵化 4~5d 的生殖嵴中。
关键词:寿光鸡;原始生殖细胞;形态;迁移;分布
目 录
中文摘要……1
英文摘要……2
前言…………1
文献综述 … … … …… … … … … … … 2
1.禽类胚胎学基础…………………2
1.1 禽类卵子的结构组成…………2
1.2 禽卵的受精……………………2
1.3 禽类胚胎早期发育……………2
2.禽类原始生殖细胞研究进展……3
2.1 PGCs的特性……………………3
2.2 PGCs的形态……………………4
2.3 PGCs的体外观察和鉴定………5
2.4 PGCs起源5
2.5 PGCs的迁移……………………6
2.5.1 PGCs的分离期……………….6
2.5.2 PGCs的迁移期 ………………6
2.5.3 PGCs的安置期 ………………7
2.6 PGCs的数目……………………9
2.7 PGCs迁移机制 …………………9
2.7.1 主动迁移作用 ………………9
2.7.2 被动迁移作用………………10
2.7.3 生殖嵴的趋化作用…………10
2.7.4 细胞外基质和细胞因子的作用……………………11
试验材料与方 法 ……… 1 2
1.试验材料…12
2.试验设备 12
3.试验方法…12
3.1 鸡蛋的孵化…………………….12
3.2 胚盘的采集……………………12
3.3 胚胎的采集……………………12
3.4 PAS-苏木精整体装片染色……12
3.5 石蜡切片制作…………………13
3.6 石蜡切片 PAS-苏木精染色… 13
3.7 石蜡切片 HE 染色……………14
试验部分 ………… ……… 1 5
1.试验结果…15
1.1 整体压片染色结果……………15
1.2 连续切片染色结果……………15
1.3 各期 PGCs 的形态观察………15
1.4 各期中 PGCs 的迁移、聚集及分布如下描述………15
2 讨论………18
2.1 PGCs 的特性和形态……………18
2.2 PGCs 的迁移和聚集……………19
2.2.1 PGCs 的迁移…………………19
2.2.2 PGCs 的分裂增殖……………20
2.3 PGCs 的定居……………………20
2.3.1 PGCs 到达性腺的时间………20
2.3.2 性腺分化时组织结构的变化21
结论…………22
参考文献…. 23
附录……… 27
图版说明….34
致谢…………37
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