宫腔镜结合C-erbB-2、nm23及ER表达对子宫内膜癌早期诊断意义
宫腔镜结合C-erbB-2、nm23及ER表达对子宫内膜癌早期诊断意义
原继荣 肖兵 杜亚丽
（哈尔滨医科大学附属第二医院妇产科，黑龙江 哈尔滨 150086）
摘要：目的 探讨宫腔镜结合C-erbB-2、nm23及ER表达在子宫内膜癌中的诊断意义。方法 宫腔镜检查2400例患者，对筛查出的35例子宫内膜癌、10例内膜不典型增生及10例正常内膜，用免疫组化SP法检测C-erbB-2、nm23和ER表达。结果 ：C-erbB-2、nm23、ER阳性表达率依次为74.29%、51.43%、54.29%；50%、30%、60%；30%、10%、90%。三者nm23、ER阳性表达率明显升高，差异有显著性(P<0.05)； C-erbB-2阳性表达率明显降低，差异有显著性(P<0.05)。宫腔镜定位活检确诊子宫内膜癌35例（35/2400），占1.46%。结论 宫腔镜直观病灶，结合C-erbB-2、nm23及ER表达对内膜癌早期诊断有意义。
关键词：宫腔镜；C-erbB-2；nm23；ER；子宫内膜癌
The significance of hysteroscopy combined with the expression of C-erbB-2、nm23 and ER in early diagnostic of endometrial carcinoma. YUAN Ji-rong, XIAO Bing, DU Ya-li. (Department of Gynecology and Obstetrics, The second Affiliated Hospital of harbin Medical University, Heilongjiang Harbin 150086,China)
Abstract: Objective: To detect the significance of hysteroscopy combined with the expression of C-erbB-2、nm23 and ER in early diagnostic of endometrial carcinoma. Methods: 2400 patients were examined by hysteroscopy, the expression of C-erbB-2、nm23 and ER were examined in SP immunohistochemical method among the 35 cases of endometrial carcinoma\10 cases of uterus atypical hyperplasia endometrium and 10 cases of normal endometrium .Results: the positive expression rates of C-erbB-2、nm23 and ER is74.29%、51.43% 、54.29%;50 % 、30%、60%；30%、10%、90%;respectively. in the three endometrium tissues, the positive expression rates of nm23 and ER is higher significantly(p<0.05);the positive expression of C-erbB-2 is lower significantly(p<0.05). using hysteroscopy combined with directed biopsies showed 35 cases of endometrial carcinoma（35/2400）, the percentage is 1.46%。Conclusion: Hysteroscopy can be used to observe the endometrial focusis and biopsies ,which combined with the expression of C-erbB-2、m23 and ER have great significant in early diagnosis of endometrial carcinoma.
Key words: Hysteroscopy ；C-erbB-2protein；nm23 genes；estrogen receptor；Endometrial Carcinoma
子宫内膜癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，近年发病率呈上升和年轻化的趋势[1]。宫腔镜可以直视下检查宫腔内病变,对可疑病灶定位活检,是诊断子宫内膜病变的金标准,也是发现早期子宫内膜癌的金标准[2]。研究表明癌基因 C-erbB-2、抑癌基因nm23及雌激素受体(estrogen receptor ER)在子宫内膜癌中的表达对子宫内膜癌的诊断及判断预后有重要作用。本文目的是探讨宫腔镜结合C-erbB-2、nm23及ER表达在子宫内膜癌中的早期诊断意义
资料与方法
一、 研究对象
选取哈尔滨医科大学第二附属医院妇科腔镜诊室2005.1-2007.11间就诊患者，对有异常子宫出血特别是绝经后阴道不规则流血的患者2400例，行宫腔镜检查及诊刮术，子宫内膜组织用石蜡包埋保存。
二、方法
1.鼠抗人C-erbB-2、nm23及ER、单克隆抗体、免疫组化SP试剂盒，DAB显色剂等均为上海长岛抗体诊断试剂有限公司产品。
2.检测方法：应用德国Wisap公司生产的外鞘直径5mm硬性宫腔检查镜。5%葡萄糖溶液膨宫，膨宫压力90～120mmHg。置入宫腔镜，依次观察宫颈管→宫腔→子宫内膜及血管情况。并对可疑位点镜下取材，刮出组织送病检。常规石蜡包埋，取石蜡组织切成4μm 厚的切片，采用免疫组化S-P法进行染色，一抗为C-erbB-2、nm23及ER多克隆抗体，用DAB显色。显微镜下观察判定结果。
3.免疫组织化学结果判定
(1)C-erbB-2以胞浆和胞膜呈棕黄色为阳性。判断标准：阳性细胞数<25%为(+)，25%-50%(++)，≥50%为(+++)，无阳性细胞为阴性。
(2)nm23 阳性染色位于癌细胞的胞浆 呈棕黄色颗粒或团块，弥漫性分布。根据癌细胞胞浆内棕黄色为阳性。判断标准：阳性细胞数<25%为(+)，25%-50%(++)，≥50%为(+++)，无阳性细胞为阴性
(3)ER定位于细胞核呈棕黄色为阳性。判断标准：阳性细胞数<25%为(+)，25%-50%(++)，≥50%为(+++)，无阳性细胞为阴性。
三、统计学方法
采用Fish确切概率法及Spearman相关检验统计方法，所有数据以SPSS 13.0统计软件包进行统计学处理。
结 果
一、宫腔镜检查
在2400例宫腔镜检查的结果中，子宫内膜癌占2.92%(35/1200)。子宫内膜癌常表现为弥漫性或局灶性乳头状生长,乳头极不规则,大小不一,组织糟脆,易出血,某些病变内膜凹凸不平或粗糙,灰白色或伴溃疡、出血、坏死等；对可疑病变行活检，有助于发现较小的或早期病变。
二、C-erbB-2 、nm23及ER在不同子宫内膜组织学类型的表达
10例正常的子宫内膜组织中C-erbB-2 、nm23、ER，阳性表达率分别为30%(3/10)；10%(1/10)；90%(9/10)；10例子宫内膜不典型增生中C-erbB-2 、nm23、ER，阳性表达率分别为50%(5/10)；30%(3/10)；60%(6/10)；35例子宫内膜腺癌组织中C-erbB-2、nm23、ER，阳性表达率分别为74.29%(26/35)； 51.43%(18/35)；54.29%(19/35)。从正常内膜到内膜腺癌，C-erbB-2阳性表达率明显升高，差异有显著性意义(P=0.033，p＜0.05＝、nm23阳性表达率明显降低，差异有显著性意义(P=0.018，p＜0.05＝、ER阳性表达率明显降低差异有显著性意义（P=0.048，p＜0.05＝。见表1。
表1 C-erbB-2 、nm23及ER在不同子宫内膜组织学类型的表达
注：#a与c比较P=0.033 P<0.05；* a与c比较P=0.018 P<0.05；+ a与c比较P=0.048 P<0.05
三、C-erbB-2 、nm23及ER表达与子宫内膜癌临床病理特征关系
C-erbB-2在子宫内膜癌中的阳性表达率随着临床分期的增加而增加即在(Ⅰ～Ⅱ)与(Ⅲ～Ⅳ) Rs=0.375 P<0.05差异有显著性。nm23阳性表达率随着临床分期及病理分级的增高而减低，其中(Ⅰ～Ⅱ)与(Ⅲ～Ⅳ)G1与G3之间有显著差异性Rs =-0.438 P<0.05；Rs =-0.439 P<0.05。ER阳性表达率随着临床分期的增加而降低即在(Ⅰ～Ⅱ)与(Ⅲ～Ⅳ)Rs =-0.581 P<0.01；Rs=-0.446 P<0.05差异有显著性。
表2 C-erbB-2 、nm23及ER表达与子宫内膜癌临床病理特征关系
讨 论
一、宫腔镜检查对早期发现内膜癌有重要作用
子宫内膜的病理学检查是子宫内膜癌的确诊依据，因宫腔镜检查可直视宫腔并对可疑病灶刮取送检，减少了传统单纯分段诊刮宫的盲目性，还避免了因刮宫可能导致的出血、肿瘤污染及转移。Marchetti[3]回顾分析181例子宫内膜癌患者，宫腔镜诊断的敏感度为93.10%,特异性为99.90%，阳性预测值为99.96%，阴性预测值为98.18%。本文采用宫腔镜检查子宫内膜癌的敏感性为100%，与文献报道一致。并且本文结合癌基因、抑癌基因蛋白及雌激素受体的表达，提高了宫腔镜对早期子宫内膜癌及癌前病变的诊断率。
二、检测C-erbB-2、nm23、ER有助于子宫内膜癌的早期诊断
肿瘤的发生、发展是以多个原癌基因激活和抑癌基因失活为基础的多步骤、多阶段过程[4]原癌基因C-erbB-2蛋白基因位于17号染色体长臂上，结构与表皮因子受体相似。在细胞的生长、增殖和分化过程中发挥作用，其过度表达与肿瘤的恶性程度呈正相关[5]Somerville等研究C-erbB-2在子宫内膜癌发生机制中的作用，发现分化程度愈高，早期癌中C-erbB-2 表达愈强，说明C-erbB-2 的过度表达在一些癌的起始阶段或早期发展中有重要作用[6]本研究结果显示,子宫内膜癌C-erbB-2阳性表达率为74. 29% ，它的表达与肿瘤浸润子宫肌层深度、临床分期、细胞分级有关。
nm23 基因是一种与肿瘤转移表型抑制相关的基因，称转移抑制基因，位于人 17号染色体的长臂2区1带，其蛋白产物为二磷酸核苷激酶(NDPK)，此酶通过调节 G蛋白介导的细胞信号传递反应，影响微丝、微管细胞骨架蛋白的生物活性，改变细胞的粘着力和迁移力，抑制肿瘤转移[7] Kapitanovic等[8]在卵巢癌的研究发现，nm23基因与淋巴结转移密切相关，无淋巴结转移者表达水平明显高于中淋巴结转移者。Watanbe等[9]报道，nm23基因仅与肿瘤的细胞分化有关，与临床分期和淋巴结转移无关，并与绝经情况、肌层浸润、雌孕激素受体无关。而 Marone 等[10]认为，nm23基因与子宫内膜癌淋巴结转移及肌层浸润程度呈负相关，可作为判断治疗和预后的指标。本文结果表明：(1)nm23阳性表达率在临床(Ⅰ～Ⅱ)期明显高于临床(Ⅲ～Ⅳ)期，两者比较差异有显著性。(2)nm23阳性表达率与肌层浸润有关，差异有统计学意义。(3)nm23在无淋巴结转移者的阳性表达率明显高于有淋巴结转移者。
子宫内膜癌被认为是激素依赖性肿瘤[11] 。与正常内膜一样, 多数内膜癌含有雌激素受体，受体含量与许多临床病理特征有关，是预测预后和指导治疗的重要因素之一[12]。ER位于细胞核中，当受体与激素结合形成复合物后，以活化的形式结合到染色体的特定部位，引起基因的活化，启动转录合成新的mRNA，继而引起新的蛋白质合成，通过这些具有生物学功能的蛋白质调节细胞的生长和代谢[13]。本研究结果显示随着临床病理分期的进展，ER 阳性表达率明显下降;肿瘤组织分化程度越高,ER 阳性表达率越低;不同肌层浸润程度的阳性表达率比较，肌层浸润深，ER阳性表达率低 。
综上所述，本文采用宫腔镜检查定位取活检的方法结合原癌基因C- erbB- 2抑癌基因nm23及ER的表达，提高了宫腔镜对早期子宫内膜癌及癌前病变的诊断率。因此运用基因检测手段和临床检查方法将子宫内膜癌的诊断提到了更早的阶段。
参 考 文 献
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宫腔镜结合C-erbB-2、nm23及ER表达对子宫内膜癌早期诊断意义
