生化汤对药物流产后氧化/抗氧化平衡的影响
[摘要] 目的：通过对比观察药流生化汤组及药流对照组血清中丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)的含量，从氧化应激方面探讨生化汤应用于防治药流后阴道出血的机理，为临床上合理应用推广生化汤提供理论基础和实验参考依据。方法：采用化学比色法分别检测MDA、T-AOC、CuZn-SOD在药流生化汤组及药流对照组血清中含量的差异，了解生化汤对药物流产后患者血清中氧化/抗氧化平衡状态的影响。结果：生化汤可明显升高药物流产后患者血清中T-AOC、总SOD和CuZn-SOD表达，同时MDA表达明显降低（P﹤0.01）。结论：药物流产后服用生化汤可改善氧化/抗氧化失衡，减少流产后的出血量及出血时间，值得临床广泛推广使用。
[关键词]生化汤；药物流产；氧化应激
Effect of Shenghua Decoction on oxidation / antioxidant balance after medical abortion
Tang Wei, Lin Xia-jing
Department of Gynecology, GuangDong Province Hospital Of Traditional Chinese Medicine ,Guangzhou 510120
Objectives: Through observing the effect of Shenghua Decoction on balance of oxidation/antioxidation after medical abortion , to explore the Shenghua Decoction in the mechanism of vaginal bleeding prevention from oxidative stress, for the clinical application of Shenghua Decoction to provide reasonable the theoretical basis and experimental evidence. Methods: Colorimetry was used to detect the level of MDA、T-AOCand CuZn-SOD between Shenghua Decoction group and medical abortion group.Results: The expression of T-AOC, total SOD and CuZn-SOD in the serum of patients with medical abortion was significantly increased by Shenghua Decoction , and the expression of MDA was significantly decreased. (P﹤0.01). Conclution: The use of Shenghua Decoction after medical abortion can improve the imbalance of oxidation / antioxidation and reduce the amount of bleeding and bleeding time after abortion. It is worth popularizing in clinical practice.
Key Words: Shenghua Decoction，medical abortion , oxidative stress
米非司酮配伍米索前列醇的药物流产是避孕失败后终止非期望妊娠的有效措施，但因存在药流不完全需清宫及药流后流血时间过长等缺点，而限制了其在临床的广泛应用。如何提高药流成功率及缩短出血时间，防止近期并发症的发生是当前急需研究的课题。临床运用经典名方生化汤及其加减方防治药流后阴道流血，疗效确切[1]。现代药理研究证实，生化汤可增加妊娠子宫敏感性，加强子宫收缩，改善微循环障碍，促进细胞凋亡，同时还能抗炎、镇痛、镇静，有利于子宫内蜕膜组织迅速排出，使子宫内膜尽早修复[2-4]。以往对中药制剂的研究有相当一部分局限于药效的观察，对整体的作用机制研究不多。而对中药复方药效作用原理进行现代化研究也是当今我国生命科学研究的重点项目之一。本研究从氧化应激方面探讨生化汤对药物流产后氧化/抗氧化平衡的影响，探讨生化汤防治药流后阴道出血的可能机理。
1 资料与方法
1.1.研究对象
1.1.1选取在广东省中医院妇科要求药流终孕的早孕妇女。纳入标准：①经双合诊，妊娠试验，B超确诊为宫内早孕;②平时月经规则,经量正常;③半年内未服用激素类药物及抗前列腺素药物;④无生殖系统炎症及肿瘤；⑤未放置宫内节育器。
1.1.2用药与分组：在研究对象知情同意下收集符合上述条件的病例随机分成2组：
药流生化汤组（n=13例）：停经≤7周，第一天晨7时服米非司酮50mg，晚7时25mg，第二天早晚各服25mg，第3天晨7时服25mg，总量150mg。，8时来我院服米索前列醇600μg观察6h待孕囊排出。于服米索前列醇当日始服生化汤煎剂,每日2次,每次1袋,连服5 d（组成：当归15g，川芎15g，桃仁10g，炙甘草5g，炮姜5g）。药流第7天抽取肘静脉血，离心后取血清置-80℃超低温冰箱冻存待测。
药流对照组（n=17例）：停经≤7周，第一天晨7时服米非司酮50mg，晚7时25mg，第二天早晚各服25mg，第3天晨7时服25mg，总量150mg。，8时来我院服米索前列醇600μg观察6h待孕囊排出。药流第7天抽取肘静脉血，离心后取血清置-80℃超低温冰箱冻存待测。
1.2实验方法：
1.2.1主要试剂与仪器：SOD分型测试盒，MDA测试盒，T-AOC测试盒，考马斯亮兰蛋白测定测试盒均购自南京建成生物工程研究所。WFJ-IP(722)型分光光度计购自上海航空测控技术研究所。
1.2.2化学比色法分别检测MDA、T-AOC、CuZn-SOD在上述两组血清中含量：分别按照试剂盒说明将各试剂混匀，静置10min，按要求的不同波长处，1cm光径比色杯，空白管调零，测各管吸光度。再按计算公式算出各样品含量。
1.2.4统计学分析：采用SPSS19.0医学统计软件行进行数据分析。分析结果采用t检验，MDA、T-AOC、总SOD、CuZn-SOD用PU均值±标准差（ ±S）表示，以P＜0.05作为差别有统计学意义。
2结果
表1. MDA、T-AOC 、总SOD和CuZn-SOD在药流生化汤组及药流对照组中的含量（ ±S）及两组比较（P＜0.05差别有统计学意义）
3 讨 论
氧化应激是指机体内抗氧化物质和氧化物生成之间的不平衡状态,两者间的失衡与超氧自由基增多有关,是组织氧化损伤的表现,也是人类多种疾病共有的组织病理渐进性变化过程。氧化应激与妊娠密切相关, 在孕早期母胎血液循环刚刚建立时胎盘存在着氧化应激现象，正常情况下胚胎自身可以应付氧化应激，抗氧化剂会随着升高,使氧化/抗氧化在新的水平上保持平衡[5-7]。但如果线粒体功能降低，ROS生成过多或抗氧化物质含量减少和(或)活性降低,机体内会蓄积过多的ROS, 导致细胞氧化损伤。而氧化损伤又进一步促进ROS的产生，形成一个恶性循环，从而出现氧化/抗氧化失衡，最终可引起流产[8]。自然流产与氧化应激有密切关系，孕酮撤退导致蜕膜间质细胞中的CuZn-SOD表达下降，LPO和COX-2升高、激活NF-κB 引起PGF2α合成增加与所诱发的自然流产有关,并推测CuZn-SOD可以通过清除与PGF2α合成有关的超氧自由基而使妊娠得以维持[9]。雌二醇做为一种潜在的内源性抗氧化剂，可抑制ROS产生、NF-κB激活引起的氧化应激，孕酮以剂量依赖方式削弱这种抑制作用,米非司酮可阻断孕酮针对雌二醇的这种作用[10]。因此，米非司酮可加重氧化/抗氧化失衡，促进ROS产生和NF-κB激活[11]。
生化汤源出自南宋末年萧山竹林寺的《女科秘要》，至清代《傅青主女科•产后编》收录而得以广泛流传。中医对药流后阴道流血病机的认识有气虚、血瘀、血热三方面病因。研究表明采用生化汤治疗防治终止妊娠产后出血具有较好的临床效果,能够减少产时和产后的出血量[12]。生化汤主要功效是温经活血,祛瘀止痛,生新止血。方中重用当归养血活血、化瘀生新、温经散寒，一物三用，最切产后病机，故为君药。研究报道当归具有抑制炎症反应，抗氧化，调节机体免疫功能的作用[13]。川芎活血行气，桃仁活血祛瘀，均为臣药。川芎、当归超临界CO2萃取物均具有一定程度的体外抗氧化能力,其中当归超临界C02萃取物体外抗氧化能力比川芎超临界CO2萃取物略高[14]。炮姜入血分散寒、温经止痛，炙甘草调和诸药，诸药配伍使瘀血去而新血生，血行归经则阴道出血自止。张秉成《成方便读》中云：“夫产后气血大虚，然有败血不去，则新血亦无由而生，故见腹中疼痛等证，又不可以祛瘀为首务也，方中当归养血，甘草补中，川芎理血中之气，桃仁行血中之瘀，炮姜色黑入营，助归草以生新，佐芎桃而化旧”。
本实验结果表明：生化汤可明显升高药物流产后患者血清中T-AOC、总SOD和CuZn-SOD表达，同时MDA表达明显降低。据此推断：服用米非司酮后出现氧化应激反应，氧化/抗氧化失衡导致流产。流产后服用生化汤可改善氧化/抗氧化失衡，减少流产后的出血量及出血时间，值得临床广泛推广使用。
参考文献
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