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毕业论文-重组大肠杆菌补料发酵及融合蛋白纯化工艺的研究，共18页，10288字。
摘 要：本文主要研究内容是重组大肠杆菌补料发酵的优化，以得到融合蛋白并进行分离纯化。实验内容包括工程菌活化，工程菌补料发酵优化，选择蛋白胨、酵母提取物、氯化钠三个因素进行三水平正交试验，结果表明，采用蛋白胨1.5g，酵母提取物1.125g，氯化钠0.75g的补料方案最好。以最优补料方案大量培养重组菌，对数中前期乳糖诱导表达，菌体离心、破碎处理，离心上清液，柱优化的咪唑浓度洗脱。蛋白上金属螯合琼脂糖凝胶6BFF柱以后分别用缓冲液A、100mmol/L咪唑、2000mmol/L咪唑、400mmol/L咪唑冲洗。通过电泳检测200mmol/L咪唑冲洗的效果最好。
关键词：补料发酵，杂合肽，融合蛋白，纯化

目 录
1 引言………1
2 材料与方法2
2.1 材料…2
2.1.1 材料
2.1.2 试剂
2.1.3 实验器材
2.1.4 溶液的配制
2.2 方法与步骤5
2.2.1 重组大肠杆菌的活化
2.2.2 实验正交设计
2.2.3 正交设计试验
2.2.4 重组菌的摇瓶补料发酵
2.2.5 重组蛋白表达量的检测
2.2.6 重组蛋白的初分离纯化
3 结果与讨论…8
3.1 重组菌补料发酵条件8
3.1.1 正交设计试验
3.1.2 重组菌药瓶补料发酵
3.2 重组蛋白分离纯化实验 10
3.3 讨论 10
4 总结和展望11
参考文献13
致 谢………15