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毕业论文-重组融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的生物学活性检测，共51页，21029字，附任务书、开题报告、文献综述、开题报告等
课题的内容和任务要求
1. 课题的研究内容
（1）Lowry试剂法检测TAT-HA-aFGF27-154蛋白溶液的浓度；
（2）建立3T3细胞活性检测体系；
（3）MTT法检测融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154和HA-aFGF27-154促3T3细胞增殖作用；
（4）计算出TAT-HA-aFGF27-154的活性单位。
2. 课题的任务要求
（1）建立融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的细胞生物学活性检测模型；
（2）摸索融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的最佳治疗浓度；
（3）以HA-aFGF27-154融合蛋白作为对照，探讨穿膜肽TAT作为药物载体对aFGF27-154活性的影响。

摘 要：目的：对早期表达的融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154进行细胞活性检测，找出最佳的药物浓度，为进一步的生物学应用提供理论基础。方法：纯化得到的融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154通过超滤除盐并浓缩，冻干后于-80℃保存备用。体外培养3T3细胞，MTT法检测融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的活性。结果：表达、纯化得到的融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154去除了野生型aFGF对NIH/3T3细胞的分裂活性，在低浓度条件条件下，对NIH 3T3细胞没有明显的促增殖作用。在外源加入肝素的刺激下，相同浓度的融合蛋白促NIH/3T3细胞分裂的活性增加，其促增殖活性呈浓度依赖性。结论：本研究成功建立融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的体外测活方法，为利用TAT作为药物载体，以及非促分裂型aFGF应用于临床提供有效方法。
关键词：MTT法；细胞测活；促增殖活性

目 录
中文摘要………………………………………………………………………………5
外文摘要………………………………………………………………………………6
引言……………………………………………………………………………………7
1.材料………………………………………………………………………………7
1.1 融合蛋白和细胞………………………………………………………………7
1.2主要试剂………………………………………………………………………7
1.2.1细胞培养相关试剂………………………………………………………7
1.2.2 主要仪器设备……………………………………………………………7
2．实验步骤………………………………………………………………………8
2.1 融合蛋白的除盐与浓缩……………………………………………………8
2.2 融合蛋白的冻干……………………………………………………………8
2.3 3T3细胞的培养……………………………………………………………8
2.4 MTT测活……………………………………………………………………8
2.5 统计学分析…………………………………………………………………9
3．实验结果………………………………………………………………………9
3.1 3T3细胞的体外培养………………………………………………………9
3.2 融合蛋白的MTT测活………………………………………………………9
4．讨论……………………………………………………………………………14
参考文献……………………………………………………………………………16
致谢…………………………………………………………………………………18

研究方案
1. 拟采取的研究方法或试验方法及主要技术路线
研究方法
Lowry试剂法检测融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的浓度；
3T3细胞的培养；
MTT法检测融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的活性；
计算出融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的活性单位。
技术路线
Lowry试剂法检测融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的浓度→3T3细胞的培养
→MTT法检测融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的活性→计算出融合蛋白TAT-HA-aFGF27-154的活性单位