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硕士论文-盐酸克仑特罗对小鼠心脏的毒性研究，共63页，35264字
摘要
目的：研究盐酸克仑特罗（CL）对小鼠心脏的毒性，探讨 CL 对小鼠心脏的毒性作
用机理，为其风险评估提供理论依据。
方法：选用 4 周龄健康清洁级雄性昆明小鼠 100 只，体重 18-22 g，随机分为五组，
每组 20 只，分别为对照组（生理盐水）、1 组（0.1 mg/kg b.w.）、2 组（1 mg/kg b.w.）、3
组（2 mg/kg b.w.）和 4 组（5 mg/kg b.w.），各组小鼠均通过腹腔注射给药，1 次/d，连
续给药 30 d。试验期间每天观察小鼠的精神、食欲和行为活动等情况；每天称量小鼠体
重，并详细记录。末次给药后 24 h，监测小鼠的心电图（ECG）变化，测定小鼠血清乳
酸脱氢酶（LDH）、心脏系数、心肌 ATP 酶活性和抗氧化能力，并通过组织切片和电子
显微镜技术，观察心肌组织形态学和超微结构变化，最后确定 CL 对心脏的最大无作用
剂量（NOEL）。
结果：
1. 试验期间，各组小鼠均无死亡且体重呈正性增长。与对照组小鼠相比，第 2、3
和 4 组小鼠均出现不同程度的流涎、呼吸急促和兴奋等症状。与对照组相比，第 4 组小
鼠平均体重从第 25 d 开始增长缓慢（P<0.05）；试验结束时，第 3 组与第 4 组小鼠平均
体重显著低于对照组小鼠体重（P<0.01）。
2. 给药处理 30 d 后，CL 导致小鼠 ECG 异常，且具有剂量依赖性。第 2、3 和 4 组
小鼠心率加快，窦性心动过速，T 波低平，与对照组相比差异均极显著（P<0.01）；J 点
下移，第 2 组与对照组相比差异显著（P<0.05），第 3 组和第 4 组与对照组相比差异均
极显著（P<0.01）。
3. 小鼠的血清 LDH 活性随 CL 剂量增加呈升高趋势，但无剂量依赖性。第 2 组小
鼠的血清 LDH 活性与对照组相比差异显著（P<0.05）；第 3 组与第 4 组小鼠的血清 LDH
活性与对照组相比差异均极显著（P<0.01）。
4. 小鼠的心脏系数随 CL 剂量增加呈升高趋势，但剂量依赖性不显著。第 3 组与第
4 组小鼠的心脏系数与对照组相比差异均极显著（P<0.01）。
5. CL 导致心肌损伤的主要组织形态学变化为小鼠心肌纤维排列紊乱，部分肌纤维
断裂，心血管扩张、血管周隙增大，心肌细胞横纹模糊，颗粒变性等；CL 导致心肌细
胞器损伤主要为线粒体肿胀、空泡化及嵴缺失，肌细胞膜外被基膜菲薄，横管和肌浆网
扩张等。
6. 小鼠心肌抗氧化能力随 CL 剂量增加呈降低趋势，其中 MDA 含量随 CL 剂量增
加呈升高趋势，且剂量依赖性显著；SOD 和 GSH-PX 活性随 CL 剂量增加呈降低趋势，
但无剂量依赖性。第 4 组小鼠心肌中 MDA、SOD 和 GSH-PX 与对照组相比差异极显著
（P<0.01）；第 3 组小鼠心肌中 MDA 和 GSH-PX 与对照组相比差异极显著（P<0.01），
SOD 差异显著（P<0.05）；第 2 组小鼠心肌中 MDA 和 GSH-PX 与对照组相比差异显著
（P<0.05）。
7. 小鼠心肌 ATP 酶活性随 CL 剂量增加呈降低趋势，但剂量依赖性不显著。第 3
组小鼠心肌 Na+-K+-ATP 酶和 Ca2+-ATP 酶的活性与对照组相比差异显著（P<0.05）；第 4
组小鼠心肌 Na+-K+-ATP 酶、Mg2+-ATP 酶和 Ca2+-ATP 酶的活性与对照组相比差异极显
著（P<0.01）。
8. 腹腔注射 30 d，CL 对小鼠心脏的 NOEL 为 0.1 mg/kg b.w.。
关键词：CL；小鼠；心脏毒性；NOEL
目录
摘要. 1
Abstract........... 3
缩略符号...........I
文献综述.......... 1
1 CL 的理化性质 ......... 1
2 CL 的药理学与毒理学研究进展 ....... 1
2.1 CL 的药理学研究进展 ....... 1
2.2 CL 的毒理学研究进展 ....... 2
3 CL 在机体内的药代动力学及残留 ... 7
3.1 CL 在机体内的药代动力学 ............ 7
3.2 CL 在机体内的残留 ........... 8
4 CL 最高残留限量标准研究进展 ....... 9
盐酸克仑特罗对小鼠心脏的毒性研究............ 10
1 试验材料.... 10
1.1 试验动物. 10
1.2 试验药品与试剂.. 11
1.3 试验仪器. 11
1.4 溶液配制. 11
2 试验方法.... 12
2.1 分组与给药.......... 12
2.2 临床观察. 13
2.3 ECG 的监测 ......... 13
2.4 血清 LDH 活性的测定 .... 13
2.5 心脏系数的测定.. 14
2.6 心肌抗氧化能力和 ATP 酶活性的测定 ... 14
2.7 病理组织学观察.. 18
2.8 超微结构观察...... 20
2.9 数据统计分析方法........... 21
2.10 CL 对小鼠心脏的 NOEL ............ 21
3 结果............ 21
3.1 临床观察. 21
3.2 CL 对小鼠 ECG 的影响... 23
3.3 CL 对小鼠血清 LDH 活性的影响 25
3.4 CL 对小鼠心脏系数的影响 .......... 25
3.5 CL 对小鼠心肌病理组织学的影响 ........... 26
3.6 CL 对小鼠心肌超微结构的影响 .. 29
3.7 CL 对小鼠心肌抗氧化能力的影响 ........... 33
3.8 CL 对小鼠心肌 ATP 活性的影响. 34
3.9 CL 对小鼠心脏的 NOEL . 35
4 讨论............ 35
4.1 CL 对小鼠临床症状和体重的影响 ........... 35
4.2 CL 对小鼠心脏损伤的影响 .......... 36
4.3 CL 对小鼠心脏毒性机理的探讨 .. 37
4.4 CL 对心脏毒性的安全性评价 ...... 40
结论... 41
参考文献........ 42
致谢... 48
附录... 49
攻读硕士学位期间发表的学术论文... 50