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资料简介
硕士论文-美国红枫组培快繁技术的研究,共67页,42912字
摘 要
美国红枫(Acer rubrum) 属槭树科槭属,原产于美国东北部,观赏价值高,适应性
强,是目前最流行的彩色绿化观赏树种之一,苗木需求量大。因此,通过组织培养技术
对美国红枫优良品种进行快速繁殖,以尽快获得大批量的优质绿化用苗,具有重要的现
实意义。
本试验通过以腋芽增殖途径再生植株的方法进行美国红枫的快速繁殖。主要采用正
交设计安排试验。主要对不同外植体的选择、不同基本培养基类型、不同激素配比和用
量的选择、以及不同活性炭用量的选择等多个方面进行了研究。通过上述研究,寻找出
组培快繁各阶段的主要影响因素和最佳培养基配方,筛选出最优技术参数组合,建立了
美国红枫最优再生体系,进而为提高美国红枫商业化生产效率,解决目前市场上美国红
枫供不应求的问题,为美国红枫工厂化育苗提供技术支持。结果表明:
1. 综合考虑污染率、腋芽萌动率、萌动所需天数三方面因素,腋芽发育启动培养
的取材时期以 4-5 月份最佳,其最高萌动率可达 90%以上。
2. 腋芽发育启动培养最佳的培养组合是 MS+6-BA(0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)。
3. 6-BA 浓度在 0.8-1.2mg/L 范围内对芽增殖效果明显,平均最高增殖 3.67 个;6-BA
和 IAA 组合对芽增殖及伸长效果显著,6-BA(1.0mg/L)+IAA(0.2mg/L)为最佳组合;低
浓度的 GA3 配合 6-BA 和 IAA 组合,对芽增殖及伸长有利,过高浓度的 GA3会造成植株细
长,生长势变弱;芽增殖及伸长培养的最佳培养组合为 1/2MS+6-BA(1.0mg/L)
+IAA(0.2mg/L)+ GA3 (1.0mg/L)。
4. 活性炭能显著提高美国红枫的生根率;培养基、NAA、6-BA 三因素对根诱导的影
响均达到显著水平,根诱导的最佳培养基配方为 1/2MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(2.0mg/L)+
活性炭(1.0mg/L)。
5. 愈伤组织诱导最佳培养组合为 WAP+6-BA(0.6mg/L)+IAA(0.3mg/L);嫩茎段为
外植体诱导效果好于叶片。
6. 愈伤组织增殖培养最佳的培养基是 WAP+6-BA(0.6mg/L)+IAA(1.0mg/L)。
7. 移栽前炼苗锻炼能显著提高移栽成活率;开瓶炼苗的效果好与闭瓶炼苗;适宜
的炼苗时间为闭瓶练苗 6d+开瓶炼苗 3d。
关键词:美国红枫;组织培养;再生体系;愈伤组织;增殖;生根
目 录
摘要… 1
英文摘要……………… 2
缩略词 3
前言 1
1.组织培养概况…………2
1.1 组织培养的基本概念2
1.2 组织培养技术的应用3
1.2.1 育种方面的应用…3
1.2.2 在基因工程上的应用………………4
1.2.3 快速繁殖和脱毒上的应用…………4
1.2.4 种质资源的保存…5
1.2.5 生产人工种子……5
2.树木组织培养的研究概况………………5
2.1 器官培养及快繁……6
2.2 胚和胚乳培养………7
2.3 愈伤组织培养………8
2.4 细胞悬浮培养………8
2.5 原生质体培养………9
2.6 体细胞胚培养和人工种子的研制…10
2.7 叶片再生研究……11
2.8 花药和花粉培育单倍体……………11
2.9 组培快繁和工厂化生产……………12
3. 树木组培繁殖再生系统的研究……13
3.1 树木组培繁殖的程序………………13
3.2 树木组培再生体系的研究进展……13
3.2.1 外植体的选择…13
3.2.2 培养基的研究…13
3.2.3 激素与其他添加物………………14
3.2.4 观赏树木植株再生的研究………15
3.3 树木组培繁殖的类型………………15
3.3.1 腋芽增殖途径…15
3.3.2 器官发生途径…15
3.3.3 体细胞胚胎发生途径……………16
材料与方法……… 17
1.实验材料……………17
2.实验设计与方法……17
2.1 腋芽增殖途径的实验………………17
2.1.1 腋芽发育的启动17
2.1.2 芽的 增殖和伸长……………… 18
2.1.3 根的诱导………18
2.2 愈伤组织诱导再生途径的实验……19
2.2.1 愈伤组织诱导实验………………19
2.2.2 愈伤组织继代培养实验…………21
2.2.3 愈伤组织分化实验………………21
2.3 生根试管苗的移栽22
2.4 统计分析…………22
结果与分析……… 24
1.腋芽增殖途径………24
1.1 腋芽的启动………24
1.1.1 不同取材时期对美国红枫腋芽萌动的影响………24
1.1.2 不同激素及培养基对腋芽萌动的影响……………25
1.2 芽的增殖和伸长…27
1.2.16-BA 对芽增殖和伸长的影响……27
1.2.26-BA 和 IAA 组合对芽增殖和伸长的影响…………29
1.2.3
GA 3 对芽增 殖和 伸长 的 影响 ………… 29
1.3 根的诱导…………30
1.3.1 活性碳对生根诱导的影响………30
1.3.2 不同培养基和激素浓度对生根诱导的影响………31
2.愈伤组织诱导再生途经………………32
2.1 愈伤组织的诱导…32
2.1.1 愈伤组织形成情况的分析………32
2.1.2 愈伤组织诱导的污染率和死亡率分析……………32
2.1.3 愈伤组织诱导率的方差分析……33
2.2 愈伤组织的继代…36
2.3 愈伤组织的分化…37
3.移栽38
讨论……………… 39
1.愈伤组织诱导再生途经和腋芽增殖再生途经的比较…39
2.外植体的取材及污染控制……………40
3.培养基和生长调节物质在组培快繁中的作用…………41
4.移栽及后期管理……42
结论……………… 43
参考文献………………44
附图 49
致谢……………… 52
专家组意见
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