学海网

硕士论文-红金银花繁殖技术及抗寒性研究，共75页，52651字
摘要
红金银花（Lonicera japonica var.chinensis）为忍冬科忍冬属植物，是金银花的变种。
花色富于变化、花期长且冬天不落叶，具有很高的观赏价值。目前还没大面积的推广应
用，本试验通过繁殖和抗寒性的研究，为红金银花早日应用于园林配置，增加观赏景观，
提供了技术支持。主要结果如下：
组织培养试验主要采用正交试验设计，对外植体的筛选、不同激素种类和用量的选
择以及不同活性炭用量的选择等多个方面进行了研究。通过上述研究，确立组织培养各
阶段的主要影响因素和最佳培养基配方，建立了红金银花的快速繁殖体系。试验结果表
明：顶芽为最佳外植体；采用 75%酒精 30s 配合 0.2%升汞 5min 对外植体灭菌效果最好；
顶芽启动培养最佳的培养基组合为 MS+6-BA1.0mg/L(单位下同)+NAA0.1-0.2+蔗糖
20.0g/L；诱导愈伤组织的最佳培养基组合为 MS+6-BA0.5+NAA0.2；最佳的芽增殖培养基
为 MS+6-BA1.5+NAA0.2+GA30.5；最佳的生根培养基为 1/2MS+6-BA0.25+NAA1.0+活性炭
1.0g/L；移栽前进行 6 天闭瓶和 4 天开瓶锻炼，移栽到草炭土与珍珠岩等体积混合的基
质中可提高成活率。
扦插试验主要采用随机试验设计，对插穗、基质、激素浓度和处理时间的选择作了
研究。通过上述研究表明：采用二年生的枝条，扦插于沙和珍珠岩（1：1）能得到生根
数、生根长度和生根率均较高的插穗；采用 100mg/L 的 NAA 处理 10min 或者采用 50mg/L
的 IBA 处理 10min 或者采用 150mg/L 的 ABT 处理 10min 能得到较高的生根率和较强的生
长势；另外，三种激素比较，效果最好的为 IBA，再次为 ABT，效果较差的为 NAA。
本试验对自然条件和低温胁迫条件下，四种忍冬属植物的抗寒性进行研究。通过测
定电导率、失水率、花青素含量、SOD 酶活性、MDA 含量以及脯氨酸含量，发现不同植
物的抗寒适应性不同。从试验中可看出，红金银花在低温环境下，可以维持较高的含水
量、积累较多的渗透调节物质和提高保护酶的活性来减轻膜的损伤，保持较低的膜脂过
氧化水平，表现出一定的抗寒性。
关键词：红金银花;组织培养;愈伤组织;扦插;抗寒性
目 录
摘要……..………………1
Abstract…………...……2
1 前言1
1.1 忍冬属植物研究进展……...……………1
1.1.1 忍冬属物种资源及观赏特性研究……1
1.1.2忍冬属植物药用价值研究..……………2
1.1.3忍冬属植物繁育技术研究..……………2
1.1.4 忍冬属植物栽培管理研究……………4
1.1.5 忍冬属植物抗性研究…………………4
1.2 红金银花研究进展………………...……5
1.3 植物组织培养研究进展……...…………5
1.3.1 器官培养…………6
1.3.2 原生质体培养……7
1.3.3 组织培养…............8
1.3.4 细胞培养………..………………..........8
1.4 抗寒研究进展 ………………..…………8
1.4.1 水分与抗寒性 ……9
1.4.2 形态结构与抗寒性9
1.4.3 生物膜与抗寒性…9
1.4.4 酶活力与抗寒性………..……………10
1.4.5 糖类物质与抗寒性……..……………10
1.4.6 脯氨酸与抗寒性……………..………11
1.4.7 激素含量与抗寒性……..……………11
1.4.8 花青素、叶绿素含量与抗寒性……………..……………11
1.5 本研究的目的意义…….………………12
2 红金银花组织培养研究………………….13
2.1 材料与方法………….…………………13
2.1.1 灭菌试验………………..……………13
2.1.2 芽的组织培养研究………..…………14
2.1.2.1 初代培养………...…………………14
2.1.2.2 继代培养...……14
2.1.2.3 壮苗与生根…………...……………14
2.1.2.4 移栽...…………15
2.1.3 愈伤组织的诱导与分化…………….15
2.1.3.1 芽和叶片诱导愈伤组织……………..…………………15
2.1.3.2 愈伤组织分化培养………...………16
2.1.3.3 花药诱导愈伤组织…………………...…………………16
2.2 结果与分析……….17
2.2.1 外植体灭菌…………..………………17
2.2.2 芽的组织培养………..………………19
2.2.2.1 不同因素对初代培养的影响……………...……………19
2.2.2.2 不同因素对继代培养的影响……………...……………21
2.2.2.3 不同因素对壮苗和生根培养的影响……………...……23
2.2.2.4 不同因素对移栽的影响………………...………………24
2.2.3 愈伤组织的诱导与分化…………………..………………24
2.2.3.1 不同因素对愈伤组织诱导的影响………...……………25
2.2.3.2 不同因素对愈伤组织分化的影响………………...……27
2.2.3.3 不同因素对花药诱导愈伤组织的影响………………..28
2.3 讨论.………………29
2.3.1 外植体的灭菌……………..…………29
2.3.2 褐化与玻璃化现象…………..………30
2.3.3 愈伤组织的分化……………..………30
2.3.4 活性炭对组织培养的影响…..………31
2.3.5 移栽…..…………31
2.4 小结…………….…32
3 红金银花扦插繁殖研究………………..…33
3.1 材料与方法…….…33
3.1.1 插穗与基质对扦插的影响…………..33
3.1.2 激素对扦插的影响..…………………33
3.2 结果与分析……………...………………34
3.2.1 插穗对扦插的影响…………..………34
3.2.2 基质对扦插的影响…………..………35
3.2.3 激素对扦插的影响…………..………36
3.2.3.1 NAA 浓度和处理时间的影响...……36
3.2.3.2 IBA 浓度和处理时间的影响………37
3.2.3.3 ABT 浓度的影响………………..……………….………39
3.3 讨论……….………40
3.3.1 插穗对扦插的影响40
3.3.2 基质对扦插的影响40
3.3.3 激素对扦插的影响40
3.3.4 插穗生根的质量……....………………41
3.4 小结…..……………41
4红金银花抗寒性机理研究………..………42
4.1 材料与方法….……42
4.1.1 相对电导率的测定……..……………42
4.1.2 枝条失水率的测定42
4.1.3 花青素的测定……42
4.1.4 SOD 活性的测定……………..………43
4.1.5 MDA 活性的测定………….…………43
4.1.6 脯氨酸含量的测定…..………………43
4.2 结果与分析…………….………………43
4.2.1 不同低温胁迫下相对电导率的变化…….……..…………43
4.2.2 不同低温胁迫下枝条失水率的变化……………..………44
4.2.3 不同条件下花青素含量的变化…………………..………46
4.2.4 自然条件下 SOD 活性的变化………………….…………47
4.2.5 自然条件下 MDA 活性的变化………48
4.2.6 自然条件下脯氨酸含量的变化………..…………………49
4.3 讨论.………………49
4.3.1 膜透性的测定………..………………49
4.3.2 SOD 活性的测定……..………………50
4.3.3 脯氨酸含量的测定…………..………50
4.3.4 MDA 含量的测定……………….……51
4.4 小结..………………51
5 结论………………….53
参考文献………………54
缩略语表………………59
附图60
致谢62
导师组意见……………63
学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书………………64