学海网

毕业设计 高去酰胺碱性蛋白酶产酶条件及酶学性质的研究，共33页，13742字
摘要
微生物碱性蛋白酶具有多样性的特点，即使是同一类型的酶，由于来源不同，性质也各不相同。本文以去酰胺度和肽键水解度为指标，对地衣芽孢杆菌（B.licheniformis）2709的突变株SDL-9的产酶条件及酶学性质进行了研究。首先对B.licheniformis SDL-9的最佳产酶条件进行研究，结果表明：接种量2%，最佳碳源为2%玉米粉、最佳氮源为2%大豆蛋白，在培养基中添加0.9%的谷氨酰胺对产高去酰胺碱性蛋白酶具有明显的诱导作用，起始pH7.0，发酵温度35℃，装液量35mL/100mL，摇床转速200r/min。最后以去酰胺度为指标，对菌株SDL-9所产的高去酰胺活性碱性蛋白酶的酶学性质进行了初步研究，结果表明：40℃为最适作用温度，最适作用pH为9，该酶热稳定性一般， 60℃保温2h后仅存5.4%的去酰胺能力；pH稳定性较好，在pH7～10之间均保持90%以上的去酰胺能力；金属离子对该酶的去酰胺能力影响较大，Tween-80对该酶的去酰胺能力具有明显的促进作用。
关键词：碱性蛋白酶；地衣芽孢杆菌；去酰胺

目录
摘要 I
Abstract II
第1章 绪 论 1
1.1 大豆蛋白概述 1
1.2 大豆蛋白的功能性质和去酰胺改性研究 1
1.2.1 大豆蛋白的功能性质 2
1.2.2 大豆蛋白的改性研究 2
1.2.3 大豆蛋白的去酰胺改性 3
1.3 碱性蛋白酶的研究现状 4
1.3.1 碱性蛋白酶的性质 4
1.3.2 碱性蛋白酶的酶学性质 5
1.3.3 碱性蛋白酶国内外的研究现状及应用 5
1.4 本文的目的意义及主要研究内容 6
1.4.1 本文的目的意义 6
1.4.2 主要研究内容 6
第2章 材料与方法 8
2.1 试验材料与仪器 8
2.1.1 菌株 8
2.1.2 培养基 8
2.1.3 主要试剂 8
2.1.4 主要仪器设备 8
2.2 试验方法 8
2.2.1 粗酶液的制备 9
2.2.2 测定方法 9
2.2.3 高去酰胺碱性蛋白酶产酶条件的优化 11
2.2.4 高去酰胺碱性蛋白酶酶学性质的研究 12
第3章 结果与分析 14
3.1 高去酰胺碱性蛋白酶产酶条件的优化 14
3.1.1 SDL-9种子生长曲线 14
3.1.2 接种量对产酶的影响 14
3.1.3 碳源对产酶的影响 15
3.1.4 氮源对产酶的影响 15
3.1.5 诱导物谷氨酰胺对产酶的影响 16
3.1.6 起始pH值对产酶的影响 16
3.1.7 发酵温度对产酶的影响 17
3.1.8 不同装液量对产酶的影响 17
3.1.9 摇床转速对产酶的影响 18
3.2 高去酰胺碱性蛋白酶酶学性质的研究 18
3.2.1 酶的最适作用温度 18
3.2.2 酶的最适作用pH值 18
3.2.3 酶的热稳定性 19
3.2.4 酶的pH稳定性 19
3.2.5 金属离子对该酶去酰胺能力的影响 20
3.2.6 表面活性剂浓度对该酶去酰胺能力的影响 20
结 论 22
参考文献 23
致 谢 24