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免费下载硕士论文-胶东半岛地区绣线菊属植物种质资源及RAPD分析研究

  • 资源类别:论文
  • 资源分类:生物农医
  • 适用专业:园林植物与观赏园艺
  • 适用年级:大学
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资料简介
硕士论文-胶东半岛地区绣线菊属植物种质资源及RAPD分析研究,共76页,42300字
摘 要
绣线菊属(Spiraea L.)植物为蔷薇科落叶灌木,色、香、形俱佳,耐干旱、寒冷、
瘠薄,具有极高的观赏价值和园林应用潜力。中国是绣线菊属的现代分布和分化中心,
种质资源丰富。胶东半岛位于我国东部沿海,自然环境独特,植物区系成分复杂,有丰
富的绣线菊属植物资源分布,因其长期处于天然自生状态,具有宝贵的抗性基因。目前
关于胶东半岛地区绣线菊属植物资源调查及遗传育种方面的研究未见报道。
本文对胶东半岛地区绣线菊属野生植物资源和栽培资源进行了详细调查,并对 17
份绣线菊属植物材料进行了 RAPD 分析。主要结果如下:
1.胶东半岛地区野生绣线菊属植物资源主要分布于崂山、昆嵛山、牙山、大泽山等
山区,共有 5 个种,4 个变种,分别为三桠绣线菊(S. trilobata)、华北绣线菊(S. fritschiana)、
土庄绣线菊(S.pubescens)、疏毛绣线菊(S.hirsuta)、大叶华北绣线菊(S. fritschiana
var.angulata)、小叶华北绣线菊(S. fritschiana var.parvifolia)、三桠绣线菊毛叶变种(S.
trilobata var. pubescens)和粉花绣线菊光叶变种(S. japonica var. fortunei)。
2.胶东半岛地区园林应用的绣线菊属植物主要见于青岛、威海等地的公园、植物园
和高校校园内。总体应用频度较低,数量较少,形式单一。常见有 8 个种、2 个品种,
其中以金山绣线菊(S. bumalda ‘Gold Mound’)、金焰绣线菊(S. bumalda ‘Gold Flame’)、粉
花绣线菊(S. japonica)和珍珠绣线菊(S. thunbergii)4 种应用较多,常丛植于草坪供
观赏或群植做地被材料。另外麻叶绣线菊(S. cantoniensis)、李叶绣线菊(S. prunifolia)、
菱叶绣线菊(S. vanhouttei)、中华绣线菊(S. chinensis)及绣球绣线菊(S. blumei)亦有
少量栽培。
3.采用改良 CTAB 法分别对 17 份绣线菊属植物的冬芽和嫩叶进行总 DNA 提取,结
果发现,冬芽的 DNA 纯度比嫩叶高,并达到了 RAPD 反应的要求。采用单因素优化对
影响 RAPD 扩增效果的因素进行优化,筛选出了最佳的 20μl 反应体系和反应程序:
10×Taq buffer 2μl,Taq 酶 1.0U,0.15mmol/L dNTP,DNA 2ng/μl,引物 0.2μmol/L,
Mg2+2.0mmol/L;94℃预变性 4min,然后进行 40 个循环:94℃变性 45s,37℃退火 1min,
72℃延伸 1min,最后 72℃延伸 5min,4℃终止反应。
4.利用最佳的反应体系,从40条S系列随机引物中筛选出22条扩增效果好的引物应
用于17份材料;22条引物共检测到371个位点,其中多态性位点335个,位点多态性比率
为90.30%;遗传距离的变异范围在0.615-0.805之间;建立了17份绣线菊属植物的亲缘关
系树形结构图,UPGMA聚类结果在遗传相似度0.676处,材料被分为三大类,说明RAPD
技术在绣线菊属植物种间划分和鉴定上有很高的灵敏性和准确性。
5.试验结果显示了绣线菊属种质资源丰富的多态性以及种间遗传基础的复杂性,并
证明 RAPD 技术可用于绣线菊属植物的鉴定与分类,其聚类结果与传统形态分类学基本
吻合。RAPD 技术从分子水平揭示出绣线菊属植物遗传背景,为绣线菊属的育种工作和
新品种选育奠定了良好的基础。
关键词: 胶东半岛
绣线菊属
种质资源
RAPD 分析
目录
摘 要............. Ⅰ
Abstract ......... Ⅲ
1 前言............. 1
1.1 绣线菊属植物研究进展.......... 1
1.1.1 绣线菊属资源研究............... 1
1.1.2 引种与育种研究... 3
1.1.3 栽培与繁殖技术研究........... 5
1.1.4 孢粉学及解剖学研究........... 6
1.1.5 其它方面研究....... 7
1.2 RAPD 标记及其在观赏植物中的应用 ... 8
1.2.1 RAPD 标记技术的特点 ........ 8
1.2.2 RAPD 技术在观赏植物中的应用 ........ 8
1.3 研究的目的和意义 10
2 胶东半岛地区绣线菊属种质资源研究... 11
2.1 研究方法 11
2.1.1 野生资源研究..... 11
2.1.2 栽培资源研究..... 11
2.2 研究结果 11
2.2.1 野生绣线菊属植物资源..... 11
2.2.2 栽培绣线菊属植物资源..... 21
2.2.3 胶东地区绣线菊属植物形态特征与应用 ......... 22
2.3 讨论........ 27
3 绣线菊属植物的 RAPD 分析 .. 29
3.1 材料与方法............ 29
3.1.1 试验试剂与仪器. 29
3.1.2 基因组 DNA 的提取与纯化 .............. 30
3.1.3 模板 DNA 的检测与定量分析 .......... 30
3.1.4 RAPD 反应体系及扩增程序的优化 .. 31
3.1.5 数据处理............. 31
3.2 结果与分析............ 32
3.2.1 DNA 的提取 ........ 32
3.2.2 RAPD 反应体系的优化 ...... 32
3.2.3 RAPD 分析 .......... 37
3.3 讨论........ 41
3.3.1 关于基因组 DNA 提取 ...... 41
3.3.2 RAPD 反应体系的优化 ...... 42
3.3.3 关于绣线菊属植物的亲缘关系......... 42
缩略词表....... 45
参考文献....... 46
图版说明....... 51
图版........... 53
致谢............... 60
导师意见....... 61
论文独创性声明........... 62
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