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资料简介
硕士论文-婴儿配方乳粉中维生素B12检测方法的研究,共61页,32019字
摘 要
目的:维生素 B12 又称氰钴胺素。主要存在于动物性食品中,深红色针状晶体,结构性
质稳定。它是维持正常造血功能、促进机体生长、保持神经系统功能的必需维生素,对
人体健康具有重要作用。维生素 B12 在食品中的含量很低。婴儿配方乳粉根据其类母乳
化食品的要求,需要添加符合国家要求含量的维生素 B12。本文论述了近年来维生素 B12
检测方法的研究现状,分析了各种检测方法的特点,并根据实际检验需要和婴儿配方乳
粉的特点对维生素 B12 检测方法进行了研究。研究出了高效液相色谱紫外检测与荧光检
测两种不同的方法。
方法:婴儿配方乳粉的基质复杂,本文针对其特点对样品的前处理方法进行了大量的实
验研究,探索出了以弱酸缓冲液除杂蛋白,固相萃取柱净化提取液,高纯氮气吹扫浓缩
维生素 B12 为主要特点的实验方法,为高效液相色谱的检测提供了条件。而在荧光检测
中,为使维生素 B12 具有荧光性,需要在前处理中对其进行衍生转化,主要采用强碱热
处理,裂解分子结构,产生具有荧光性的α—核唑磷酸。本文对色谱条件进行了摸索,
提出了一套新的而又切实可用的色谱检测方法。在高效液相紫外检测方法研究中:采用
BDS HYPERSIL C18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以水-乙腈为流动相;流速 0.25ml/min,
检测波长 361nm,柱温 40℃。洗脱梯度: 0-10min,乙腈在流动相中的比例为 10%;
10-35min,乙腈的比例线性升到 30%。在高效液相荧光检测的方法研究中:采用 C18 MG
色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-磷酸缓冲盐为流动相;流速 1ml/min,检测波
长 250/312nm,柱温 25℃。洗脱梯度:0-5min,乙腈在流动相中的比例为 10%;5-30min,
乙腈的比例线性升到 15%。
结果:紫外检测方法:维生素 B12的检出限为 20ng/ml,线性范围在 0.0505~3.232μg/ml,
重复性实验的 RSD%为 2.5289%,回收率在 92.23%-96.68%,相对标准偏差(RSD)为 2.04%。
荧光检测方法:维生素 B12的检出限为 50ng/ml,线性范围在 0.075525~4.8336μg/ml,
重复性实验的 RSD%为 8.626%,回收率在 86.37%-92.68%,相对标准偏差(RSD)为 2.68%。
本文探索并优化了实验条件,将维生素 B12 在不同固相萃取柱与色谱柱上的保留特性进
行了比较研究,定性定量分析了乳粉中的维生素 B12。在对数种婴儿配方乳粉的检验中取
得了满意的效果。这两种检测方法高效、快捷,满足了婴儿配方乳粉中维生素 B12 检测
的实际需要,达到了实验目的。同时,在大量实践中,本文对色谱检测技术有了深的认
识,提出了不同以往的看法,认为低流速能够解决某些物质出峰过低,峰型不好的问题。
另外实验中也发现了许多问题,包括维生素 B12 存在形式的细分研究、其他化学物质的
影响作用,样品前处理的改进,亲和免疫吸附柱的使用等等,都有待进一步的研究。
关键词:维生素 B12;婴儿配方乳粉;检测方法;高效液相


摘要…..……ⅰ
Abstrct...…ⅱ
第 1 章 前言……..………………..1
1.1 维生素 B12研究概况……….…1
1.1.1 理化性质和结构......1
1.1.2 维生素 B12的存在与分布….2
1.1.3 日摄入量…………………..2
1.1.4 代谢过程…………………..3
1.1.5 生理功能…………………..4
1.1.6 维生素 B12的缺乏与疾病…5
1.1.7 维生素 B12吸收抗性………6
1.1.8 国内外检测方法研究现状..7
1.2 本研究的目的、意义和内容.11
第 2 章 高效液相紫外检测婴儿配方乳粉中维生素 B12的方法研究………………..………………..12
2.1 引言….12
2.2 材料与方法……..…………..12
2.2.1 仪器……………….12
2.2.2 试剂.12
2.2.3 溶液的配制……………….12
2.2.4 方法.13
2.3 结果与讨论………………….14
2.3.1 样品前处理条件的确定.…………...…......15
2.3.2 色谱分析条件的确定……………………..20
2.3.3 方法的适用性分析…………….....………25
2.4 小结………..………………....30
第 3 章 高效液相荧光检测婴儿配方乳粉中维生素 B12的方法研究………………….…………..…..31
3.1 引言….31
3.2 材料与方法…………………..31
3.2.1 仪器…………..……………31
3.2.2 试剂……………......31
3.2.3 方法……………......31
3.3 结果与讨论.………………….32
3.3.1 样品前处理………………..32
3.3.2 维生素 B12衍生转化……… 32
3.3.3 色谱分析条件的确定…………………………..34
3.3.4 方法的适用性分析………..37
3.4 小结…..41
第 4 章 总结和展望………………42
4.1 两种分析方法的比较………..42
4.2 本研究的主要结论…………..42
4.3 研究的创新点………………...44
4.4 研究的前景思考与展望……..44
参考文献…..45
致谢………..49
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