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免费下载硕士论文-蝴蝶兰(Phalaenopsis spp)组织培养过程中褐化问题的研究

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资料简介
硕士论文-蝴蝶兰(Phalaenopsis spp)组织培养过程中褐化问题的研究,共71页,36797字
摘要
蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)是一种名贵花卉,被称为热带兰中的“兰花皇后”。
褐化现象在蝴蝶兰组织培养过程中普遍存在,严重影响外植体的分化和组培的成功。
因此,研究影响蝴蝶兰组培褐化的因素和控制褐化的方法具有重要的意义。本研究以
蝴蝶兰无菌苗为材料,研究了不同的吸附剂(活性炭和 PVP)和抗氧化剂(柠檬酸、
谷胱苷肽、半胱氨酸、抗坏血酸和硫代硫酸钠)对蝴蝶兰初代培养和继代培养中的褐
化控制,探讨了不同的外植体和基础培养基对其褐化的影响。主要研究结果如下:
在茎尖、叶片、根尖三种外植体的九个处理中, 0.3 ㎝长的茎尖和 1.0 ㎝×1.0
㎝叶片的褐化较轻,分化较好,是比较好的外植体选择。
不同外植体适用于不同的基础培养基。叶片在改良 KC 上褐化较轻,分化较好;
茎尖在 1/2MS 和 MS 上褐化较轻,分化较好;B5 与 MS 有利于根尖的分化;根段在
所选 7 种基础培养基上均无褐化和分化。
蝴蝶兰初代和继代培养中,当活性炭浓度大于 0.5 g·L-1 可以完全控制褐化;但
在初代培养中浓度大于 0.2 g·L-1、继代培养中浓度大于 0.3 g·L-1 外植体就不再进行
分化。活性炭利于幼苗生长和生根,其中以 1.0 g·L-1 和 1.5 g·L-1 的效果较好。
PVP 对蝴蝶兰褐化的抑制、分化和生长的作用都不明显,其中 2.0 g· L-1 和
2.5 g· L-1 的效果相对较好。
在 5 种抗氧化剂中,柠檬酸在初代培养中既能很好的控制褐化,又对外植体的分
化有一定的促进作用,其中以 400 mg·L-1 的效果最好;继代培养中,尚未找到既能
控制褐化又不影响幼苗分化和生长的方法,柠檬酸与谷胱苷肽对生长和分化的效果相
对较好。
关键词:蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.);组织培养;外植体;基础培养基;褐化控制
目 录
第一章 绪论 ……1
1 植物组织培养褐化问题的研究
1
1.1 褐化的机理
2
1.2 影响褐化的因素
……………4
1.3 控制褐化的方法………………8
第二章
材料与方法 ……………13
2.1 供 试 材 料
………………13
2. 2 实验器材及药品
2. 3 本研究的操作方法
…………13
………13
2.4 实验设计 …14
2. 4.1 不同外植体对褐化的影响 14
2. 4.2 不同基础培养基对褐化的影响 ……………14
2.4.3 不同吸附剂对褐化的影响…15
2. 4.4 不同抗氧化剂对褐化的影响15
2. 5 数据统计 …16
第三章
结果与分析 ……………17
3.1 不同外植体对褐化的影响 …17
3.2 不同基础培养基对褐化的影响 ………………19
3.2.1 外植体为无菌叶块时不同基础培养基对褐化的影响 ………19
3.2.2 外植体为茎尖时不同基础培养基对褐化的影响 ……………21
3.2.3 外植体为根尖和根段时不同基础培养基对褐化的影响 ……23
3.3 活性炭对褐化的影响 ………24
3.3.1 初代培养中活性炭对褐化的影响 …………24
3.3.2 继代培养中活性炭对褐化的影响 …………26
3.4
PVP 对褐化的影响
………28
3.4.1 初代培养中 PVP 对褐化的影响 ……………28
3.4.2 继代培养中 PVP 对褐化的影响 ……………29
3.5 抗氧化剂对褐化的影响 ……31
3.5.1 初代培养中不同抗氧化剂对褐化的影响 …31
3.5.2 继代培养中不同抗氧化剂对褐化的影响 …33
第四章 讨论……37
4.1 不同外植体对褐化的影响 …37
4.2 不同基础培养基对褐化的影响 ………………37
4.3 活性炭对褐化的影响 ………38
4.4 PVP 对褐化的影响
…………39
4.5 不同抗氧化剂对褐化的影响 39
第五章 结论……41
5.1 不同外植体对褐化的影响 …41
5.2 不同基础培养基对褐化的影响 ………………41
5.3 活性炭对褐化的影响 ………41
5.4
PVP 对褐化的影响
………41
5.5 不同抗氧化剂对褐化的影响
……………42
致谢 ……………43
参考文献 ………44
附录:实验所选七种培养基配方…53
图版说明 ………56
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