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硕士论文-刺参弧菌病病原菌分离、鉴定及防治研究，共69页，36941字
摘 要
1 本试验分离鉴定了青岛地区三个养殖场发病刺参携带的 18 株细菌，经 PCR 筛选、
生理生化鉴定，其中 A-1、A-2、A-4 为美人鱼弧菌，A-10、A-11、A-12 为海蛹弧菌，A-9
为副溶血弧菌，A-3、A-5、A-6 为杀鲑气单胞菌史氏亚种，A-7、A-8 为松鼠葡萄球菌，
A-13、A-17、A-18 为海单胞菌，A-14、A-15、A-16 为交替单胞菌。
2 将 18 株分离菌进行回归试验，三株美人鱼弧菌可以引起刺参发病。比较了浸染、
创伤感染、注射三种方式，证明创伤感染是引起刺参发病的主要途径；注射方式致死刺
参速度最快，创伤方式次之，浸染方式最慢。18 株细菌混合后可以引起刺参死亡率增加，
可能细菌之间有协同作用。病原菌在溶氧 5.0mg/L 的条件下对刺参的致死率比 8.0mg/L
条件下明显上升，说明溶氧对刺参发病有很大影响。三株病原菌适宜生长条件为盐度 10
‰～50‰， pH5～10，16℃～28℃。
3 药敏试验显示环丙沙星，依诺沙星，恩诺沙星，红霉素，壮观霉素，左氧氟沙星，
链霉素对三株美人鱼弧菌都有较强抑制作用，进一步测定了敏感药物的 MIC、MBC。大蒜
汁对两株美人鱼弧菌 A-1，A-4 有较强杀灭作用，但是对 A-2 株没有抑制效果。成功筛
选到 1 株乳酸菌，命名为 B-1 株，生理生化鉴定为嗜酸乳杆菌。其胞外产物对美人鱼弧
菌具有较好的抑制作用，并且进一步探讨了胞外产物的抑菌特性，该菌株的抑菌成分对
热不敏感，蛋白酶 K 对其活性有较大影响。成分可能是细菌素。研究了 B-1 株产生的细
菌素量和生长曲线的关系；比较了吐温 80、聚乙二醇 6000、吐温 20 三种刺激因子对 B-1
株产细菌素的影响，证明吐温 80 效果最好，并确定了最佳加入量为 0.15%。确定了 B-1
株 37℃培养温度细菌素产量最大。
关键词：美人鱼弧菌；刺参；细菌素；乳酸杆菌
目 录
中文摘要………Ⅰ
英文摘要………Ⅱ
缩略符号………Ⅲ
1 绪论 …………1
1.1 研究的目的和意义 ……1
1.2 弧菌和弧菌病研究现状 1
1.2.1 弧菌和弧菌病概述 …1
1.2.2 弧菌致病机理 ………2
1.3 弧菌病防治方法 ………3
1.3.1 鱼类弧菌病疫苗免疫 3
1.3.2 免疫增强剂的使用 …5
1.3.3 药物治疗 7
1.3.4 生物防治 8
1.3.5 乳酸菌的抑菌研究 …9
2 病原菌的分离鉴定………12
2.1 材料与方法12
2.1.1 试验材料12
2.1.2 试验方法12
2.1.2.1 刺参携带菌的分离12
2.1.2.2 刺参携带菌的鉴定12
2.1.2.3 分离菌回归试验…13
2.1.2.4 病原菌生长特性的初步研究…13
2.2 结果………14
2.2.1 刺参携带菌的分离…14
2.2.2 刺参携带菌的鉴定…14
2.2.3 分离菌回归试验……23
2.2.4 病原菌生长特性的初步研究……26
2.3 讨论………32
3 防治方法的研究…………34
3.1 材料和方法34
3.1.1 试验材料34
3.1.2 试验方法34
3.1.2.1 药敏试验…………34
3.1.2.2 大蒜汁的抑菌作用35
3.1.2.3 乳酸菌的抑菌研究36
3.2 结果………37
3.2.1 药敏试验结果………37
3.2.2 大蒜对病原菌的抑制作用………39
3.2.3 乳酸菌的抑制效果…40
3.3 讨论………45
参考文献………48
全文总结………55
致谢56