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用聚乙二醇诱导选定的成对原生质体间的融合电子书
摘要
用微吸管选取单对原生质体, 在含聚乙二醇(PEG) 的微滴中诱导融合。此法克服了常规的PEG 群体融合方法中的盲目性, 能排除一方亲本原生质体自相融合和多个原生质体的融合, 以及未融合的原生质体的混杂, 保证融合产物来自选定的成对原生质体, 从而使PEG 融合技术精确化。此法在植物细胞工程和细胞生物学研究中有广泛的应用前景。
关键词　原生质体; 融合; 聚乙二醇a

通过原生质体或亚原生质体间的融合进行细胞杂交或细胞重建, 是植物细胞工程的重要手段。现有的融合技术中, 以聚乙二醇(PEG) 诱导融合和电融合二者占主要地位。其中PEG 融合技术具有设备简单、操作方便等优点, 至今仍然广泛采用。但现行PEG 融合技术是在原生质体群体的条件下进行的, 因而在融合产物中除了所欲获得的杂种细胞外,还不可避免地含有未融合的原生质体、一方亲本原生质体之间的融合体以及多个原生质体的融合体, 从而增加了融合后筛选的困难。此外, 在有些情况下, 可供融合的亲本原生质体数量很少, 现行的PEG 法亦难适用。Koop 等创建的成对原生质体微电融合技术克服了上述缺点, 使原生质体融合技术得以精确化, 不仅成功地用于体细胞原生质体[ 1 ]、亚原生质体[ 2, 3 ]的融合及细胞包器的转移[ 4—6 ] , 而且还被Kranz 等采用, 成功地进行了玉米精、卵的体外融合[ 7 ] , 并再生了植株[ 8 ]。然而, 这种微电融合技术需要特殊仪器, 难以推广应用。如果能够使PEG 融合技术提高到成对原生质体融合的
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