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硕士论文-水杉中抑菌活性成分的研究，共54页，20996字
摘 要
本论文以水杉（Metasequoia glyptostroboides）为试验材料，对其中含有的抑
菌活性成分进行了研究。
采用菌丝生长速率法测定了水杉根、皮、叶等部位提取物对几种植物病原菌
的抑制作用，结果表明水杉叶乙醇提取物的抑菌活性较好。浓度为 0.1 g /mL（以
干材料计）时，提取物对苹果腐烂病菌、小麦赤霉病菌、棉花枯萎病菌和葡萄黑
痘病菌的抑制率分别为 85.89%、71.93%、65.32% 和 77.67%。
水杉叶的醇粗提物用水分散，经石油醚、乙酸乙酯和正丁醇等溶剂依次萃取。
乙酸乙酯萃取物对苹果腐烂病菌的 EC50 为 0.10 mg/mL，乙醇粗提物对苹果腐烂
病菌的 EC50 为 0.83 mg/mL。乙酸乙酯萃取物的活性比乙醇粗提物的提高 8 倍多。
乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离得到一单体化合物 A，其对苹果腐烂病菌和葡
萄黑痘病菌的 EC50 分别为 2.54×10-2 mg/mL 和 1.13×10-1 mg/mL，比乙醇粗提物活
性分别提高 33.2 倍和 13.2 倍。化合物经红外和核磁共振等手段鉴定为一种半日
花烷型二萜类化合物－enantio-3-hydroxylabda-8(20),13-dien-15-oic acid。
关键词： 水杉；抑菌活性；活性物质；enantio-3-hydroxylabda-8(20),13-die
n-15-oic acid
目 录
摘 要 .1
前 言 .3
一 文献综述 ..5
1 具有抑菌活性的植物资源...5
1.1 国外抑菌活性植物的研究概况.....5
1.2 国内抑菌活性植物的研究概况.....7
1.3 商品化的植物源杀菌剂品种.........9
2 植物中的主要抑菌活性成分............9
3 植物中活性物质的提取、分离方法........... 11
4 水杉的研究概况 ...12
4.1 水杉化学成分的研究......12
4.2 水杉生物活性的研究.......13
二 材料与方法 .........14
1 试验材料 ..14
1.1 植物样品 14
1.2 供试菌种 ............14
1.3 仪器与试剂 ........14
2 生物活性测定方法 15
2.1 PDA 培养基的制作 .........15
2.2 细菌培养基的制作..........15
2.3 培养基的灭菌 ....16
2. 4 生长速率法 .......16
2 .5 抑菌圈法 ...........16
3 试验方法 ..17
3.1 水杉各部位提取物的抑菌活性....17
3.2 水杉叶甲醇提取物对多种病原菌的抑制作用......17
3.3 水杉叶不同溶剂提取物的抑菌活性.........17
3.4 水杉叶中抑菌活性成分的提取分离........17
3.5 化合物 A 的抑菌活性测定...........18
3.6 化合物 A 的结构鉴定......18
三 结果与分析 .........19
1 水杉各部位提取物的抑菌活性......19
1.1 水杉各部位提取物对植物病原真菌的抑制作用.19
1.2 水杉各部位提取物对植物病原细菌的抑制作用.19
2 水杉叶甲醇提取物的抑菌活性.......20
2.1 水杉叶甲醇提取物对不同病原菌的抑制作用......20
2.2 水杉叶甲醇提取物对几种病原菌的 EC50 比较 ..21
3 水杉叶的不同溶剂提取物的抑菌作用.......22
4 水杉叶中抑菌活性成分的提取和分离........23
4.1 水杉叶中抑菌活性成分的提取....23
4.2 乙醇粗提物的萃取分离..23
4.3 乙酸乙酯萃取物的柱层析分离....25
5 化合物 A 的抑菌活性测定.26
6 化合物 A 的结构鉴定.........27
四 讨论 ........29
五 结论 ........30
参考文献 ......31
附 录 ............35