硕士论文-桑黄菌生物学特性研究
- 资源类别：论文
- 资源分类：生物农医
- 适用专业：植物病理学
- 适用年级：大学
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资料简介
硕士论文-桑黄菌生物学特性研究，共76页，29437字
摘 要
本文以开发利用桑黄这一新兴的药用菌物资源，探明其菌丝体生长所需条件（环境条
件、营养条件）和测定几种胞外酶活性为目的，对桑黄的主要生物学特性进行测定，以正
交试验确定了桑黄菌丝体生长所需的最适培养基，为桑黄的活性成分研究、开发新药及人
工栽培桑黄子实体提供了科学依据；通过 DNA 测序技术等技术，确定三种桑黄菌种为火木
层孔菌。主要结果如下：
1.环境条件对桑黄菌丝体的影响
桑黄菌丝体能在 10-34℃的温度条件下生长，菌丝体最适生长温度为 28℃。3-5℃为
菌种保藏最适温度。
在桑黄菌丝体生长过程中，给与适量的光照能促进菌丝体生长，但形成菌落比较稀疏，
颜色较淡，呈绒毛状，而在黑暗条件下形成的菌落，菌丝浓密，颜色较深；当光照大于 600Lx，
光照抑制菌丝生长。
桑黄菌丝生长的最适 pH 为 7。
液体深层培养条件下，最适装瓶量为 500ml 三角瓶装液量 100ml，最适接种量为 10%。
2.营养条件对桑黄菌丝体的影响
通过桑黄菌丝体营养条件单因子筛选试验确定：最适碳源为玉米面和葡萄糖，最适
氮源为酵母膏，最适无机盐为 KH2PO4和 MgSO4?7H2O。单因子正交试验筛选出适宜桑黄菌
丝体生长的培养基为：葡萄糖 3%，酵母膏 0.3%，玉米面 1%，磷酸二氢钾 0.01%，硫酸
镁 0.05%。
3.胞外酶活性测定
桑黄液体深层发酵过程中几种酶进行测定发现，多酚氧化酶和漆酶的活性比较低，
而纤维素酶和蛋白酶的活性较高，在第 7 天左右活性最强。说明桑黄对淀粉类物质、纤
维素类、木质素类物质均具有降解能力。
4.桑黄品种鉴定
三菌株 ITS 片段序列与裂蹄层孔菌 ITS 片段序列同源性最近，ISSR 标记显示三菌
株可能为同一种菌株。通过对子实体和菌丝体显微结构进行观察，证明是火木层孔菌。
关键词：桑黄；菌丝体；发酵；生物学
目录
摘 要 ......... 1
Abstract ...... 2
前言 ........
1.药用真菌的研究现状 ......
2.桑黄简介 ....
2.1 多糖研究现状 ..
2.2 胞外酶研究现状
2.3 药理作用研究 ..
2.4 人工栽培及发酵技术应用 ...
研究内容 ......
1.环境条件对桑黄菌丝体的影响 .........
1.1 供试菌株......
1.2 培养基配方.... 9
1.3 主要仪器...... 9
1.4 培养条件及观测方法....... 9
1.5 试验方法..... 10
2 营养条件对桑黄菌丝体生长的影响 .... 11
2.1 供试菌株..... 11
2.2 培养基配方... 11
2.3 主要仪器..... 11
2.4 培养条件及观测方法...... 11
2.5 试验方法..... 12
3 桑黄四种常见胞外酶活性测定 ........
3.1 供试菌株.....
3.2 培养基配方...
3.3 主要仪器.....
3.4 试验方法.....
3.2 液体培养.....
3.3 样品制备.....
3.4 酶活力测定...
3.5 酶活性定义...
4 几种桑黄菌株品种鉴定 ...
4.1 材料.........
4.2 DNA 提取 .....
4.3. ISSR 分析 ...
4.4．ITS 测序 ....
4.5 子实体观察...
4.6 菌丝体观察...
结果与分析 ...
1.环境条件对桑黄菌丝体生长的影响 ....
1.1 温度条件对桑黄菌丝体生长的影响 .....
1.2 起始 pH 对桑黄菌丝体生长的影响......
1.3 装瓶量对桑黄菌液体深层培养的影响...
1. 4 接种量对桑黄菌丝体深层发酵影响....
1.5 光照对桑黄菌丝体生长的影响.........
2 营养条件对桑黄菌丝体生长的影响 ....
2.1 不同碳源对桑黄菌丝体的影响 .........
2.2 不同氮源对桑黄菌丝体的影响.........
2.3 不同碳氮比筛选试验......
2.4 无机盐对桑黄菌丝体生长的影响.......
2.5 正交试验 .....
3 几种胞外酶活性测定 .....
3.1 桑黄发酵液中纤维素酶活性测定结果...
3.2 桑黄发酵液中漆酶活性的测定结果.....
3.3 多酚氧化酶的活性测定结果
3.4 蛋白酶活性的测定结果....
3.5 讨论.........
4 不同桑黄菌株品种鉴定 ...
4.1 ISSR 标记 ....
4.2．ITS 测序 ....
4.3 子实体观察...
4.4 菌丝体观察...
4.5 讨论.........
结论与讨论 ...
1 环境条件对桑黄菌丝体生长的影响 ....
2 营养条件对桑黄菌丝体的影响 ........
3 胞外酶活性测定.........
4 桑黄品种鉴定
参考文献 .....
附录 .........
致谢 .........
摘 要
本文以开发利用桑黄这一新兴的药用菌物资源，探明其菌丝体生长所需条件（环境条
件、营养条件）和测定几种胞外酶活性为目的，对桑黄的主要生物学特性进行测定，以正
交试验确定了桑黄菌丝体生长所需的最适培养基，为桑黄的活性成分研究、开发新药及人
工栽培桑黄子实体提供了科学依据；通过 DNA 测序技术等技术，确定三种桑黄菌种为火木
层孔菌。主要结果如下：
1.环境条件对桑黄菌丝体的影响
桑黄菌丝体能在 10-34℃的温度条件下生长，菌丝体最适生长温度为 28℃。3-5℃为
菌种保藏最适温度。
在桑黄菌丝体生长过程中，给与适量的光照能促进菌丝体生长，但形成菌落比较稀疏，
颜色较淡，呈绒毛状，而在黑暗条件下形成的菌落，菌丝浓密，颜色较深；当光照大于 600Lx，
光照抑制菌丝生长。
桑黄菌丝生长的最适 pH 为 7。
液体深层培养条件下，最适装瓶量为 500ml 三角瓶装液量 100ml，最适接种量为 10%。
2.营养条件对桑黄菌丝体的影响
通过桑黄菌丝体营养条件单因子筛选试验确定：最适碳源为玉米面和葡萄糖，最适
氮源为酵母膏，最适无机盐为 KH2PO4和 MgSO4?7H2O。单因子正交试验筛选出适宜桑黄菌
丝体生长的培养基为：葡萄糖 3%，酵母膏 0.3%，玉米面 1%，磷酸二氢钾 0.01%，硫酸
镁 0.05%。
3.胞外酶活性测定
桑黄液体深层发酵过程中几种酶进行测定发现，多酚氧化酶和漆酶的活性比较低，
而纤维素酶和蛋白酶的活性较高，在第 7 天左右活性最强。说明桑黄对淀粉类物质、纤
维素类、木质素类物质均具有降解能力。
4.桑黄品种鉴定
三菌株 ITS 片段序列与裂蹄层孔菌 ITS 片段序列同源性最近，ISSR 标记显示三菌
株可能为同一种菌株。通过对子实体和菌丝体显微结构进行观察，证明是火木层孔菌。
关键词：桑黄；菌丝体；发酵；生物学
目录
摘 要 ......... 1
Abstract ...... 2
前言 ........
1.药用真菌的研究现状 ......
2.桑黄简介 ....
2.1 多糖研究现状 ..
2.2 胞外酶研究现状
2.3 药理作用研究 ..
2.4 人工栽培及发酵技术应用 ...
研究内容 ......
1.环境条件对桑黄菌丝体的影响 .........
1.1 供试菌株......
1.2 培养基配方.... 9
1.3 主要仪器...... 9
1.4 培养条件及观测方法....... 9
1.5 试验方法..... 10
2 营养条件对桑黄菌丝体生长的影响 .... 11
2.1 供试菌株..... 11
2.2 培养基配方... 11
2.3 主要仪器..... 11
2.4 培养条件及观测方法...... 11
2.5 试验方法..... 12
3 桑黄四种常见胞外酶活性测定 ........
3.1 供试菌株.....
3.2 培养基配方...
3.3 主要仪器.....
3.4 试验方法.....
3.2 液体培养.....
3.3 样品制备.....
3.4 酶活力测定...
3.5 酶活性定义...
4 几种桑黄菌株品种鉴定 ...
4.1 材料.........
4.2 DNA 提取 .....
4.3. ISSR 分析 ...
4.4．ITS 测序 ....
4.5 子实体观察...
4.6 菌丝体观察...
结果与分析 ...
1.环境条件对桑黄菌丝体生长的影响 ....
1.1 温度条件对桑黄菌丝体生长的影响 .....
1.2 起始 pH 对桑黄菌丝体生长的影响......
1.3 装瓶量对桑黄菌液体深层培养的影响...
1. 4 接种量对桑黄菌丝体深层发酵影响....
1.5 光照对桑黄菌丝体生长的影响.........
2 营养条件对桑黄菌丝体生长的影响 ....
2.1 不同碳源对桑黄菌丝体的影响 .........
2.2 不同氮源对桑黄菌丝体的影响.........
2.3 不同碳氮比筛选试验......
2.4 无机盐对桑黄菌丝体生长的影响.......
2.5 正交试验 .....
3 几种胞外酶活性测定 .....
3.1 桑黄发酵液中纤维素酶活性测定结果...
3.2 桑黄发酵液中漆酶活性的测定结果.....
3.3 多酚氧化酶的活性测定结果
3.4 蛋白酶活性的测定结果....
3.5 讨论.........
4 不同桑黄菌株品种鉴定 ...
4.1 ISSR 标记 ....
4.2．ITS 测序 ....
4.3 子实体观察...
4.4 菌丝体观察...
4.5 讨论.........
结论与讨论 ...
1 环境条件对桑黄菌丝体生长的影响 ....
2 营养条件对桑黄菌丝体的影响 ........
3 胞外酶活性测定.........
4 桑黄品种鉴定
参考文献 .....
附录 .........
致谢 .........
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