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资料简介
硕士论文-美丽胡枝子核型分析与辐射育种研究,共57页,33918字
摘 要
本文运用60COγ射线的物理诱变方法对美丽胡枝子(Lespedeza formosa)进行了研
究,对其进行了核型分析;观测了辐射后供试材料的生物学特性,确定了美丽胡枝子种
60
美丽胡枝子植株的叶绿素含量、细胞膜透性、SOD活性、可溶性糖含量、可溶性蛋白含
量等生理生化指标分别进行了测定。
结果表明:
1.美丽胡枝子核型公式为 2n =2x=22=12m+8sm+2st,平均臂比 1.99。最长与最短染
色体的长度比为 1.84,核型类型为 2A。第 1 对为近端着丝粒染色体,第 2、3、6、11 对
为近中着丝粒染色体,余者均为中着丝粒染色体。第 1 对染色体为长染色体(L),第 2、
3、4 对染色体为中长染色体(M2),余者均为中短染色体(M1)。核型不对称系数 65.8%。
未发现次缢痕和 B 染色体。
2.美丽胡枝子种子及早期幼苗的辐射效应主要表现在生理受阻导致的幼苗生长受
到明显抑制。从辐射对美丽胡枝子种子生活力变化、种子萌发以及早期幼苗生长的影响
看,临界剂量和半致死剂量之间的范围 203.9-400Gy,可作为美丽胡枝子种子辐射诱变处
理的适宜剂量范围,有望产生较多的突变。
经过试验,从辐射后代中筛选出较稳定的矮化型美丽胡枝子。但突变株至少需经过
3 代的选择,才能确定其遗传稳定性,本试验由于时间原因仅从辐射当代筛选出部分突
变体,尚不能确定这些突变性状是否能稳定遗传,还有待于进一步观察和开展细胞学效
应的鉴定。
3.辐射明显改变了美丽胡枝子叶片的叶绿素含量。辐射后叶片中叶绿素 a 与对照有
显著差异,其含量在辐射后显著增加,但不呈明显的正相关。叶绿素 b 与对照间也有显
著差异,其含量在辐射后显著降低,同样不呈明显的正相关。叶绿素 a+b 含量与对照差
异显著,有随剂量增加而增多的趋势。
辐射剂量不超过 300Gy 时,24h 电导率变化均小,当剂量超过 400Gy,细胞渗出液
浓度随着辐射剂量的加大而增加,且与对照差异显著;辐射剂量不超过 200Gy 时,48h
电导率变化均小,当剂量超过 300Gy 时,细胞渗出液浓度随着辐射剂量的加大而增加,
且与对照差异显著。美丽胡枝子叶片的 24h 电导率、48h 电导率变化趋势表现基本一致。
经过不同剂量辐射后,各处理的 SOD 活性均比对照降低,但低剂量辐射不引起 SOD
活性的明显变化。随着剂量的增加,下降幅度明显。
在 300Gy 处理时美丽胡枝子的可溶性糖含量最高,当剂量超过 300Gy 时,可溶性糖
含量又会随着剂量的增加而降低。
辐射可以不同程度的提高美丽胡枝子体内可溶性蛋白含量。在 100、200Gy 时,可
以迅速提高可溶性蛋白含量,但从 300Gy 开始,可溶性蛋白含量开始下降。
关键词: 美丽胡枝子
辐射
半致死剂量
目 录
摘要………………Ⅰ
Abstract…………Ⅲ
缩略语表………………Ⅳ
1.前言………………1
1.1 辐射诱变育种研究进展…………………1
1.2 辐射诱变育种研究展望…………………3
1.3 胡枝子属植物研究进展…………………3
1.3.1 引种驯化研究……4
1.3.2 育种研究…………5
1.3.3 抗逆性研究………5
1.3.4 孢粉学研究………6
1.3.5 繁殖技术研究……7
1.3.6 胡枝子属植物核型分析研究进展……9
1.4 本研究的目的意义…9
2.美丽胡枝子核型分析11
2.1 材料与方法………11
2.1.1 材料………………11
2.1.2 材料预处理………11
2.1.3 解离、染色与制片11
2.1.4显微照相和测量…11
2.1.5 计算………………12
2.1.6 分类………………12
2.1.7 利用 Adobe photoshop 进行配对和排列…………………13
2.1.8 利用 Excel 绘制核型模式图…………13
2.2 结果与分析………14
2.3 讨论………………15
3.60COγ射线辐射美丽胡枝子的生物学诱变效应……………17
3.1 材料与方法………17
3.1.1 材料………………17
3.1.2 种子的辐射………17
3.1.3 种子生活力测定…17
3.1.4 种子萌发试验……17
3.1.5 早期幼苗苗高的测定…………………18
3.1.6 适宜辐射剂量范围的确定…………18
3.1.7突变株的田间观测与筛选……………18
3.2 结果与分析………18
3.2.1辐射对种子生活力的影响……………18
3.2.2 辐射对种子萌发的影响………………19
3.2.3辐射对早期幼苗生长的影响…………20
3.2.4辐射适宜剂量范围的确定……………20
3.2.5突变株的田间观测与筛选结果………21
3.3 讨论………………23
4.60COγ射线辐射美丽胡枝子生理生化诱变效应……………25
4.1 材料与方法………25
4.1.1 叶绿素提取与测定25
4.1.2 细胞膜透性的测定25
4.1.3 SOD 活性测定…26
4.1.4 可溶性蛋白含量测定…………………26
4.1.5 可溶性糖测定……27
4.2 结果与分析………27
4.2.1辐射对叶绿素含量的影响……………27
4.2.2辐射对细胞膜透性的影响……………29
4.2.3 辐射对 SOD 活性的影响………………30
4.2.4辐射对可溶性蛋白含量的影响 ……30
4.2.5辐射对可溶性糖含量的影响…………31
4.3 讨论………………31
结论…………………33
展望…………………34
参考文献………………35
图版Ⅰ………………38
图版Ⅱ………………39
图版Ⅲ………………40
致谢41
导师组意见……………42
学位论文独创性声明…43
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