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硕士论文-琅琊鸡IGF－I基因5′非编码区多态性与早期生长性状相关性研究，共65页，36354字
摘 要
胰岛素样生长因子-Ⅰ（Insulin-like Growth Factor-Ⅰ，IGF-Ⅰ）是胰岛素样生长因
子的重要成员，对机体的生长发育、组织修复、营养代谢、细胞凋亡以及细胞分化等方
面有重要的生物学作用，是影响动物肌肉、骨骼生长发育的主要因子，但是自然存在的
IGF-Ⅰ基因 5′非编码区核苷酸序列差异是否影响琅琊鸡早期的生长性状，至今未见报道。
本试验以山东地方品种琅琊鸡为材料，克隆了此基因片段并采用 PCR-RFLP 法检测了
423 只 12 周龄非同胞琅琊鸡此编码区的多态性。并运用广义线性模型（GLM）方法分
析了基因变异与琅琊鸡的血液生化指标、早期生长发育和屠体性状的关系，初步探索了
此基因变异对表型性状的影响。结果显示：
1 运用 PCR 法从琅琊鸡血液中克隆了 IGF-Ⅰ基因 5′非编码区部分序列，长 621bp，
提交 Genbank，获登陆号 EF488284；运用 RFLP 方法对其进行遗传多态性研究，该扩增
产物经 PstⅠ酶切后，出现 AA、AB 和 BB 三种基因型，其基因型频率分别是 36.88%、
49.65%和 13.48%；对纯合子进行测序，发现在 IGF-Ⅰ基因 5′端距启动子 7.8kb 处有 A、
G 转换。经 χ2 检验，琅琊鸡在该位点上处于 Hardy-Weinberg 平衡状态（χ2＝1.088，P >
0.05）。
2 分析琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因型与血液生化指标的相关性时发现：AA 基因型个体的
血糖、总胆固醇含量和淀粉酶活性显著高于 BB 基因型（P<0.05），谷草转氨酶活性、尿
酸含量显著高于 AB 和 BB（P<0.05），谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶活性、尿素
含量极显著高于 AB 和 BB（P<0.01）；甘油三酯含量高于 AB（P<0.05）和 BB（P<0.01）；
基因型 AB 的血清磷、总蛋白和白蛋白含量显著高于 AA 型（P<0.05），血清钙含量显著
高于 BB（P<0.05）。表明 AA 基因型对肌酸激酶等肉用性能相关的生化指标有正向效应，
AB 基因型对血钙、血磷等蛋用性能相关的生化指标存在正向效应。
3 分析琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因型与体重体尺的相关性时发现：在 0~12 周龄内，AA 基
因型对体重生长和体型指数（体重分别与胫长和胸骨长的比）呈显著的正向效应
（P<0.05），使鸡的体格朝向体重大、胫骨和胸骨相对短的肉用方向发展；不同基因型
琅琊鸡的生长曲线发生交叉，说明不同阶段同一基因型对琅琊鸡的效应不一致。
4 分析琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因型与屠体性状的相关性时发现：AA 基因型个体活重、
半净膛重和脂肪含量极显著大于 BB 型（P<0.01）；屠体重、全净膛重、腿肌重和胸肌重
显著优于 AB 型和 BB 型（P<0.05）；剪切力（P<0.05）和失水率（P<0.01）也优于 BB
型。表明 AA 基因型对琅琊鸡的肌肉产量和品质有正效应。
关键词：琅琊鸡；胰岛素样生长因子-Ⅰ；PCR-RFLP；早期生长性状； 相关性
目 录
中文摘要……1
英文摘要……2
英文缩写词表4
前言…………5
文献综述……6
第一章 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因 5′非编码区的多态性检测……………………14
1.1 试验材料与方法………………14
1.1.1 试验材料……………………14
1.1.2 试验方法……………………17
1.2 结果与分析……………………21
1.2.1 琅琊鸡血液 DNA 的提取…21
1.2.2 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因 5′非编码区扩增………………21
1.2.3 目的片段的转化及质粒 DNA 的 PCR 检测……21
1.2.4 PCR 的酶切分析……………22
1.2.5 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因和基因型频率…………………23
1.2.6 群体遗传平衡………………23
1.2.7 测序结果……………………23
1.3 讨论……24
第二章 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与血液生化指标相关性分析………………25
2.1 试验材料与方法………………25
2.1.1 试验材料……………………25
2.1.2 试验方法……………………25
2.2 结果与分析……………………26
2.2.1 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与血清有机成分分析26
2.2.2 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与血清酶活分析 …………… …………………… ………… ……27
2.2.3 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与血清无机离子的分析28
2.3 讨论……29
第三章 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与体重体尺相关性分析 ………… ……31
3.1 试验材料与方法 ……………31
3.1.1 试验材料……………………31
3.1.2 试验方法……… ………………… …… ………………… ………………31
3.2 结果与分析……………………32
3.2.1 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与体重的相关分析……32
3.2.2 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与体尺的相关分析……34
3.3 讨论……40
第四章 琅琊鸡 IGF-Ⅰ基因多态性与屠体性状相关性分析…………………42
4.1 试验材料与方法………………42
4.1.1 试验材料……………………42
4.1.2 试验方法……………………42
4.2 结果与分析……………………43
4.2.1 IGF-Ⅰ基因型与屠体性状的相关性………………43
4.2.2 IGF-Ⅰ基因型与肌肉品质的相关性………………44
4.3 讨论……45
全文结论……47
参考文献……48
致谢…………54
攻读硕士期间发表的论文…………55