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硕士论文-1-甲基环丙烯对青花菜采后内源激素含量和乙烯合成关键酶及受体基因表达的影响，共56页，28485字
摘 要
以青花菜品种“曼陀绿”(Brassica olracea L. var. italica)为试材，研究了乙烯作用抑
制剂 1-甲基环丙烯(1-MCP)对青花菜采后室温条件下衰老的影响，并通过对乙烯和其它
内源激素以及乙烯生物合成途径中 ACC 合成酶、ACC 氧化酶和乙烯受体基因表达的分
析，探讨其可能的作用机制。结果表明：
1. 青花菜采后用 2.5μl·L-11-MCP 处理能够明显推迟花蕾黄化速度，延缓叶绿素降
解，但却促进乙烯的产生，1-MCP 处理主要是通过干扰乙烯的作用，而不是乙烯的生成
来延长青花菜室温条件下的贮藏时间。外源乙烯处理能够加快青花菜黄化，加速叶绿素
的降解，促进青花菜采后衰老进程。1-MCP 处理后，即使在高浓度内源和外源乙烯存在
情况下仍可延缓衰老。1-MCP 与受体有效结合，降低了组织对乙烯的敏感性，从而达到
延缓衰老的目的。
2. 1-MCP 处理延缓了青花菜采后衰老过程中 ZR 和 GA 的分解，推迟了 ABA 的积
累，原有的激素平衡被打破，建立了新的激素平衡。经 1-MCP 处理的青花菜 ABA/GA
和 ABA/IAA 比值上升缓慢。
3. 1-MCP 处理对 ACC 合成酶基因表达总体呈抑制效果，对 BO-ACS2 的抑制效果明
显好于 BO-ACS1。对 BO-ACO1、BO-ACO2 基因的抑制作用非常明显，但对 BO-ACO3
基因 mRNA 的积累有促进作用。试验中 ACC 氧化酶基因转录积累发生在乙烯高峰出现
之前，而且其转录丰度最大值出现时间与乙烯峰值时间相一致。1-MCP 处理能够抑制整
个贮藏时间内乙烯受体 BO-ETR1 和 BO-ETR2 基因的表达及贮藏后期(36-60h)BO-ERS
mRNA 的积累。
关键词：青花菜；1-MCP；内源激素；乙烯；基因表达；1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)合
成酶基因；ACC 氧化酶基因；乙烯受体基因
目录
中文摘要 ............. 1
英文摘要 ............. 2
缩略符号 ............. 4
前言 ........ 5
文献综述 5
1 乙烯生物合成与青花菜采后未成熟衰老... 5
1.1 乙烯与青花菜采后未成熟衰老... 5
1.2 乙烯生物合成途径........ 6
1.2.1 ACC 合成酶基因研究进展 ....... 6
1.2.2 ACC 氧化酶基因研究进展 ....... 7
1.2.3 乙烯受体基因研究进展............. 8
2 1-甲基环丙烯(1-MCP)的研究现状 .......... 10
2.1 1-MCP 的性质、特点及商业化应用 ....... 10
2.2 影响 1-MCP 处理效果的因素 ... 10
2.3 1-MCP 的作用模式 ..... 11
2.4 1-MCP 对基因表达的影响 ........ 11
2.5 1-MCP 的作用效果及展望 ........ 12
3 果蔬成熟衰老与植物激素关系的研究进展............ 12
3.1 果蔬后熟衰老过程中内源激素的变化规律............ 12
3.1.1 脱落酸......... 13
3.1.2 生长素........ 13
3.1.3 赤霉素......... 14
3.1.4 细胞分裂素. 14
3.2 植物激素调节果实后熟衰老的机理......... 14
材料方法 ............. 16
1 材料和处理.... 16
1.1 材料. 16
1.2 处理............. 16
2 方法 ............. 16
2.1 颜色评分..... 16
2.2 叶绿素含量测定........ 16
2.3 乙烯释放速率测定.... 16
2.4 内源激素测定............ 17
2.5 RNA 的提取 .............. 19
2.6 反转录......... 20
2.7 实时荧光定量 PCR .. 20
2.8 Northern 杂交........... 22
结果与分析 ......... 26
1 1-MCP 对青花菜外观品质和生理生化特性的影响 ........... 26
1.1 花蕾颜色和叶绿素含量的变化.............. 26
1.2 乙烯释速率的变化.... 26
1.3 内源 ZR 含量的变化 27
1.4 内源 GA 含量的变化 27
1.5 内源 IAA 含量的变化 ............. 28
1.6 内源 ABA 含量的变化 ............ 28
1.7 激素平衡与青花菜衰老的关系.............. 29
2 1-MCP 处理对乙烯合成和乙烯受体基因转录水平的影响 ............ 29
2.1 基因组总 RNA 提取质量检测 29
2.2 cDNA 合成与实时荧光定量 PCR 电泳检测 ....... 30
2.3 青花菜 ACC 合成酶基因转录水平实时荧光定量 PCR 分析.......... 30
2.4 青花菜 ACC 氧化酶基因转录水平实时荧光定量 PCR 分析.......... 31
2.5 青花菜乙烯受体基因转录水平实时荧光定量 PCR 分析 . 31
2.6 BO-ACO2 基因菌落 PCR 凝胶电泳检测 ............ 32
2.7 BO-ACO2 基因探针标记效率检测........ 33
2.8 青花菜 BO-ACO2 基因 Northern 杂交结果........ 34
讨论 36
1 1-MCP 对青花菜外观品质和内源激素含量变化的影响 ... 36
2 1-MCP 对青花菜 ACC 合成酶和 ACC 氧化酶基因表达的影响 ..... 36
3 1-MCP 对青花菜乙烯受体基因表达的影响 ........ 37
4 1-MCP 对青花菜花蕾中乙烯合成的影响及可能的调控机理 .......... 38
结论 40
参考文献 41