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硕士论文-IBV分离株部分S1蛋白基因的序列分析及致病性试验，共69页，25170字
摘 要
1、参考 Genbank 上的 IBV S1 基因序列，自行设计合成了一对跨幅约 0.6kb 的
引物。利用 RT-PCR 对 9 株 IBV 分离株 RNA 进行 RT-PCR 扩增，将其克隆到 pMD18-T
Vector 进行序列测定。用分子生物学软件对本试验测定的基因序列同 GenBank 上已
公布的参考毒株基因序列进行同源性比较。序列分析显示，这些病毒从时间、空间
和组织嗜性都没有明显的规律可循。另 2 株从病鸡中获得病毒（ZC4-3 株和 DB239-1
株）属于既不同于国内其它分离毒株，又不同于国际参考毒株的独立一群。
2、SPF 鸡的致病性试验：从 9 株流感病毒中挑选出 3 株（D-2 株，ZC4-3 株和
DB239-1 株）用于鸡的感染性试验。将 15 只 6 周龄 SPF 鸡随机分成 3 组，5 只/组，
采用滴鼻点眼和肌肉注射接种方式，接种量为 4.5ml/只，另设对照组 4 只鸡，接种
同量的蒸馏水。试验过程中共计死亡 3 只鸡，剖检死鸡，进行 RT-PCR,可见目的条
带。
关键词： 传染性支气管炎病毒；S1 基因；序列发生进化关系；SPF 鸡；致病
性
目 录
摘要………………………………
英文摘要…………………………
缩略词表…………………………
前言………………………………
文献综述…………………………
1 病原学……………………………
2 病原的生物学特征………………
3.病毒分子生物学研究进展……
4.IBV 的分型方法………………
5.致病性…………………………
试验内容
1 传染性支气管炎病毒的序列分析…………………………………
1.1 材料与方法…………………
1.1.1 材料…………………………
1.1.2 方法………………………
1.2 结果……………………………
1.2.1 各分离株 RT-PCR 扩增结果
1.2.2 菌液 PCR 鉴定结果…………
1.2.3 IBV 分离株核苷酸序列比较
1.2.4 IBV 分离株和参考株核苷酸序列比较…………………………
1.3 讨论…………………………
1.3.1 …………………………
1.3.2 扩增片段的选择…………
附图………………………………
2 不同群内分离株对鸡的致病性试验……………………
2.1 材料与方法…………………
2.1.1 材料………………………
2.1.2 方法………………………
2.2 结果…………………………
2.2.1 HA 测定结果………………
2.2.2 发病和死亡统计…………
2.2.3 剖检病理变化……………
2.2.4 RT-PCR 扩增结果………
2.3 讨论………………………
2.3.1 ……………………………
2.3.2 对 IBV 防疫的思考………
全文总结…………………………
参考文献…………………………
致谢………………………………