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硕士论文-低温胁迫对3个葡萄品种活性氧代谢和内源激素的影响，共70页，33348字
摘 要
以抗寒性不同的 3 个葡萄品种（梅鹿辄、赤霞珠和贝达）一年生枝条叶片为材料，
采用电导法测定叶片的细胞膜透性；分光光度法检测叶片中 MDA 含量，SOD、POD 和
CAT 活性，O2 产生速率和 H2O2 含量；应用组织化学定位的方法研究了 3 个葡萄品种叶
片中 O2 和 H2O2 的水平；ELISA 法测定了 5 种内源激素（IAA、ABA、GA、JA 和 iPA）
的含量，研究低温胁迫下这些生理生化指标的变化，分析各种指标与葡萄抗寒性的关系，
以期获得在葡萄生长期鉴定抗寒性的指标，为抗寒葡萄品种的选育提供理论依据。以梅
鹿辄一年生枝条叶片为材料，探讨了在低温胁迫下 H2O2 和 ABA 之间的关系，为深入探
明活性氧和植物激素在提高葡萄抗寒性中的作用奠定基础。试验初步得出以下结论：
1. 随着温度降低，葡萄叶片的相对电导率和 MDA 含量随之升高，并且抗寒性强的
品种贝达升幅最小，而抗寒性差的品种梅鹿辄升幅最大，表明相对电导率和 MDA 含量
与 3 个葡萄品种的抗寒性关系密切。在低温胁迫下，SOD、POD 和 CAT 的活性均随着
胁迫温度的降低而升高，而且抗寒性强的品种 3 种酶活性增幅都大于抗寒性越弱的品种；
其中 SOD 和 POD 对温度的变化较为敏感，适合作为葡萄抗寒性鉴定指标。O2 产生速
率随低温胁迫时间的延长呈先升高后降低趋势，抗寒性强的品种贝达 O2 的升高幅度最
小，抗寒性最弱的梅鹿辄 O2 产生速率最高，3 个葡萄品种的 O2 产生速率差异显著。叶
片 O2 组织化学定位的结果进一步证明 O2 与葡萄品种的抗寒性具有密切关系。低温处理
下 3 个葡萄品种叶片的 H2O2 含量随温度降低而增加，并且含量从高到低为梅鹿辄>赤霞
珠>贝达，与 3 个葡萄品种的抗寒性也具有关系；对 H2O2 含量的组织化学定位试验，进
一步明晰了 H2O2 含量与 3 个葡萄品种抗寒性的密切关系。
2. 3 个葡萄品种叶片中 ABA 和 JA 含量随着温度的降低明显增加，而 IAA、GA 和
iPA 随着温度降低，显著减少；IAA 变化表现出品种间显著差异，与抗寒性关系密切。
3. 随着处理温度降低，3 个葡萄品种叶片中 ABA/GA、ABA/IAA、ABA/iPA 以及
JA/GA、JA/IAA、JA/iPA 几种激素比总体变化为先升高后降低，并且温度越低，激素比
的变化幅度越大；试验结果表明，叶片中 ABA/IAA 和 ABA/GA 可以作为判断葡萄品种
抗寒性的主要指标之一。
4. 为进一步探讨葡萄的抗寒机制，研究了低温胁迫下梅鹿辄叶片中 H2O2 与 ABA
的相互关系。结果表明，H2O2 能引起 ABA 大量积累，推测，H2O2 和 ABA 共同参与葡
萄对低温胁迫的应答。
关键词：葡萄；抗寒性；激素；活性氧
目录
摘要…………………………………………………………………………………………………………1
英文摘要……………………………………………………………………………………………………2
缩略词对照表………………………………………………………………………………………………4
前言………………………………………………………………………………………………………… 5
材料与方法………………………………………………………………………………………………13
1.材料……………………………………………………………………………………………………13
2.处理……………………………………………………………………………………………………13
3.方法……………………………………………………………………………………………………13
结果与分析………………………………………………………………………………………………16
1 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片活性氧代谢的影响……………………………………16
1.1 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片细胞膜的影响…………………………………………16
1.1.1 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片细胞膜相对透性的变化……………………………16
1.1.2 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 MDA 含量的变化…………………………………17
1.2 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中保护酶的影响………………………………………19
1.2.1 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 SOD 的变化………………………………………19
1.2.2 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 POD 的变化………………………………………20
1.2.3 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 CAT 的变化………………………………………22
1.3 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片 ROS 的影响……………………………………………23
1.3.1 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片超氧物阴离子生成速率的影响……………………23
1.3.2 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中超氧物阴离子的组织化学定位…………………24
1.3.3 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片 H2O2 的影响…………………………………………25
1.3.4 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 H2O2 的组织化学定位……………………………26
2 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片 5 种激素含量的影响……………………………………27
2.1 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 ABA 和 JA 含量的影响……………………………27
2.1.1 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 ABA 含量的影响…………………………………27
2.1.2 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 JA 含量的影响……………………………………29
2.2 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 IAA、GA 和 iPA 含量的影响………………………30
2.2.1 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 IAA 含量的影响…………………………………30
2.2.2 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 GA 含量的影响…………………………………32
2.2.3 低温胁迫对 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 iPA 含量的影响…………………………………33
3 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 6 种激素比与抗寒性关系的研究……………………34
3.1 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 ABA 与生长类激素比值的变化……………………35
3.1.1 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 ABA/IAA 的变化…………………………………35
3.1.2 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 ABA/GA 的变化…………………………………36
3.1.3 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 ABA/iPA 的变化…………………………………37
3.2 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 JA 与生长类激素比值的变化……………………39
3.2.1 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 JA/IAA 的变化……………………………………39
3.2.2 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 JA/GA 的变化……………………………………40
3.2.3 低温胁迫下 3 个葡萄品种一年生枝条叶片中 JA/iPA 的变化……………………………………41
4 低温胁迫下梅鹿辄一年生枝条叶片中 H2O2与 ABA 之间的关系……………………………………44
4.1 在不同温度下梅鹿辄一年生枝条叶片中 H2O2 的变化……………………………………………44
4.2 外源 H2O2 对梅鹿辄一年生枝条叶片的细胞膜的影响……………………………………………44
4.3 低温处理下梅鹿辄一年生枝条叶片中 H2O2 与 ABA 的关系………………………………………46
讨论………………………………………………………………………………………………………48
结论………………………………………………………………………………………………………54
参考文献…………………………………………………………………………………………………55
图版……………………………………………………………………………………………………….. 61
致谢………………………………………………………………………………………………………63