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  • 资源类别:论文
  • 资源分类:生物农医
  • 适用专业:植物病理学
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资料简介
硕士论文-山东半岛主栽玉米品种对弯孢菌叶斑病抗性鉴定及抗性生理研究,共72页,45539字
摘要
玉米弯孢菌叶斑病(Curvularia lunata),在世界各地均有发生。近年来,由于气候
变化、栽培制度变更,以及玉米品种轮换等原因,该病害在我国玉米产区严重发生,发
生面积逐年扩大,已成为玉米主要病害之一。目前该病的防治主要采取以种植抗病品种
为主的综合治理措施。但病原菌的致病变异性和遗传多样性常导致玉米新品种丧失抗
性,因此研究、分析玉米抗弯孢菌叶斑病的生化机制,对于玉米弯孢菌叶斑病抗性的高
效持久利用、新化学防治药物的开发、抗病基因的克隆和抗病品种的选育具有理论和实
际指导意义。
本文研究内容包括两个方面:山东半岛地区主栽不同玉米品种对弯孢菌叶斑病的抗
感性评价和玉米品种抗感叶斑病的生理生化机制研究。根据对山东等地收集到的 15 个
主栽玉米品种进行的玉米弯孢菌叶斑病抗性室内和接种圃鉴定,结果显示:抗病或中抗
品种所占比例不足 20%,农大 108 和 LN3 抗性表现突出,特别是农大 108 多年监测抗
性持久稳定;多数品种感病,尤其掖单 22 为高感。抗病品种表现为接种后发病缓慢,
潜育期长,病斑小,病斑少;感病品种表现为病般大、病斑多,发病块,接种后 2-3d
就可以表现症状。
对以农大 108、LN3 为代表的抗病品种,和以掖单 22、金海 5 为代表感病品种,采
用比色法测定叶片中接种前后超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化
酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)含
量,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 POD、SOD、酯酶(EST)等同工酶变化,采用考马
斯亮兰 G-250 法测定可溶性蛋白质含量,采用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白质的
变化。结果表明:
过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)3 个防御酶活性变化与玉
米品种的抗感性联系紧密;而抗、感病品种间,超氧化物歧化酶(SOD)、酯酶(EST)
同工酶的表达没有明显的差异性,说明该同工酶与品种间的抗、感病性关系不密切。过
氧化物酶(POD)活性与玉米抗性呈正相关,接种后,抗病品种的 POD 酶活在第四天
迅速上升,第五天达到最大值,感病品种酶活也增加,但不如抗病品种增幅大。POD 同
功酶活性初期增高有利于玉米的抗病性提高。PPO 活性与玉米的抗感性呈正相关,接种
后,抗病感品种 PPO 活性均呈先上升再下降的趋势,但抗病品种比感病品种的最大活
性要大。PAL 活性高低是玉米弯孢菌叶斑病抗性的重要机制,PAL 活性高低以及峰值到
达的时间早晚与抗病性有密切联系,PAL 活性高、峰值到来得早有利于抗病性提高。可
溶性蛋白与玉米弯孢菌叶斑病抗性呈正相关。可溶性蛋白质含量上升速度快、上升时间
早、幅度大,则有利于抗病性的表达。
关键词:玉米弯孢菌叶斑病;抗性;防御酶;非酶类物质;生化机制
目 录
中文摘要 ...1
Abstract...3
缩略词表 ...5
前言 ...6
1 玉米弯孢菌叶斑病的研究概况 .6
2 植物抗病性的鉴定 ........8
3 植物抗病性研究 ...........10
4 植物防御反应的信号 .......20
5 研究目的及意义 ...............23
6 玉米弯孢菌叶斑病抗性鉴定及抗性生理生化基础................23
材料和方法 .......................25
1 供试品种和菌株 ................25
2 供试植株培育及接种处理 .............................25
3 发病情况调查 ..................26
4 玉米叶片抗弯孢菌叶斑病相关物质活性测定 ...26
4.1 主要试验仪器与器具 .......................2 6
4.2 试验药品 ...........................2 7
4.3 试剂配制 ...................27
4.4 寄主抗病相关酶的提取及活性测定 .............28
4.5 寄主抗性相关的非酶类物质的提取及测定 ....29
4.6 寄主抗性相关的生化物质的提取及测定 ..........30
4.7 可溶性蛋白质的提取及测定 ........................31
5 玉米叶片抗弯孢菌叶斑病同工酶及可溶性蛋白电泳 ...............3 1
5.1 SOD 同工酶电泳 ...... .. ................31
5.2 PPO 同工酶电泳 .........................3 2
5.3 POD 同工酶电泳 ....33
5.4 酯酶同工酶电泳 .......34
5.5 蛋白质 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 ..........35
结果与分析 ..........................36
1 人工接种玉米弯孢菌叶斑病抗性鉴定 ..................36
2 接种叶斑病菌对玉米寄主防御酶活性的影响 ..39
2.1 过氧化物酶 (POD)的活性化 ...... .. ............4 0
2.2 多酚氧化酶 (PPO)的活性化 ......................41
2.3 苯丙氨酸解氨酶 (PAL)的活性化 .....................41
2.4 超氧化物歧化酶 (SOD)的活性化 .......................43
2.5 过氧化氢酶 (CAT)的活性化 ............................44
3 接种叶斑病菌对玉米非酶类物质活性的影响 ..........46
3.1 丙二醛 (M DA)的含量变化 .............................46
4 接种叶斑病菌后对玉米体内生化物质活性的影响 ............4 7
4.1 木质素含量的变化 .........................4 7
5.可溶性蛋白含量变化 .4 8
6 玉米叶片抗弯孢菌叶斑病同工酶电泳 .............50
6.1 S OD 同工酶电泳 . .....................5 0
6.2 PPO 同工酶电泳 ..........................5 0
6.3 POD 同工酶电泳 .....................52
6.4 酯酶同工酶电泳 . ............................5 3
6.5 蛋白质 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 ..................5 4
结论与讨论 ........................5 5
参考文献 ... ................6 1
致谢 .........................6 6
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