您现在正在浏览:首页 > 论文 > 生物农医 > 硕士论文-H9N2亚型禽流感灭活疫苗研究

免费下载硕士论文-H9N2亚型禽流感灭活疫苗研究

  • 资源类别:论文
  • 资源分类:生物农医
  • 适用专业:动物营养与饲料
  • 适用年级:大学
  • 上传用户:bearcatzhang
  • 文件格式:word
  • 文件大小:1.05MB
  • 上传时间:2011-4-8 22:08:21
  • 下载次数:1
  • 浏览次数:64

安全检测:瑞星:安全 诺顿:安全 卡巴:安全

资料简介
硕士论文-H9N2亚型禽流感灭活疫苗研究,共68页,37134字
H9N2 亚型禽流感在我国呈地方性流行、持续存在,是目前流行范围最广危害最大的
低致病性禽流感,自 1994 年在我国首次分离以来,其流行范围已涉及我国大部分的省
市地区。本研究对 1998 年以来部分省市地区分离到的 33 株 H9N2 亚型禽流感病毒进行
序列分析,通过血凝抑制试验、动物攻毒保护等试验对 HA 蛋白基因免疫原性和疫苗保
护情况进行研究,试图筛选出交叉保护力较好、免疫谱较广的毒株,为生产用毒种的选
择提供理论依据,为 H9 亚型禽流感病毒的防控作技术储备。
试验一、H9N2 亚型禽流感病毒流行特点
本试验对 1998-2007 年从我国部分省市地区分离到的 33 株 H9N2 亚型禽流感病毒 HA
基因进行序列分析,建立 HA 基因遗传发育进化树,实时掌握 H9 亚型禽流感病毒的区域
分布和流行趋势。研究表明,所划分的基因进化树主要分为三个系列,每个系列毒株的
遗传衍化分布都较为复杂;三个系列毒株可在同一时间段内、同一地区发生流行;不同
时间的流行毒株虽有变异,但大部分归属于三个系列中。无论从时间的推移上还是地域
的转变中,病毒都没有表现出明显的时间演变与地理分布特征,进一步显示了 H9 亚型
禽流感的复杂性和多样性。
试验二、H9N2 亚型禽流感 HA 基因序列同源性差异与病毒抗原性差异的比较研究
结合试验一对 HA 基因进化树的分析和序列同源性的比较,从分离到的 33 株 H9N2
亚型禽流感病毒中挑选出具有代表性的 12 株,用 SPF 鸡制备出这些毒株的免疫血清,
应用常规检测流感病毒的血凝抑制实验(Hemagglutinin Inhibition, HI) 和鸡胚交叉
中和试验,进行交叉 HI 试验,并计算出不同毒株间的抗原相关系数,对分离的 H9N2 亚
型禽流感病毒不同毒株间的抗原性进行分析。通过上述数据的比较分析,探讨 H9N2 亚
型禽流感病毒 HA 基因核苷酸序列同源性的差异和抗原性差异间的相关性。
通过比较 H9N2 亚型禽流感病毒不同分离株间的抗原性差异,可以看到这些毒株间
抗原性变异表现较为复杂:同一地域内,不同的异变体之间的差异较小,随着时间的推
移,其变异并不明显;但在不同的区域内分离的毒株之间变异较为突出,这表明 H9N2 亚
型禽流感病毒不同分离株抗原性是与地域的改变而发生较为明显的变异。也正是由于我
国不同地区分离株之间的抗原性差异,所以导致现在正在广泛应用的油乳剂灭活疫苗在
全国各地鸡群中的保护效力参差不齐。
通过对 HA 基因核苷酸序列同源性的差异和抗原性差异的分析发现二者呈正相关。
当 HA 基因核苷酸序列变异达到一定程度时,就可以造成抗原性的改变,尤其是 HA 基因
同源性序列差异越大,这种抗原性的改变尤其明显。
试验三、H9N2 亚型禽流感地方分离株疫苗免疫保护试验及免疫效果调查
本试验结合试验一、二的数据结果,收集现在具有主要流行趋势的 3 个系列的优势
毒株 A/chicken/Fujian/08/2007(FJ08 株)、A/chicken/Shandong/LX/2007(LX 株)、
A/chicken/Yunnan/0702/2007(YN02 株)作为疫苗株。将这 3 个优势毒株与现行 H9 亚
型流行株进行交叉保护试验。研究禽流感疫苗株与流行株之间交叉免疫原性,为筛选
H9N2 亚型禽流感疫苗株提供科学依据。交叉血凝抑制试验的数据说明,同系列抗原(血
清)对同系列血清(抗原),其 HI 效价最高;同系列抗原(血清)对不同系列血清(抗
原),其 HI 效价较低,有 2~3 个滴度的差异。交叉免疫攻毒保护试验的数据也验证了
这一点:FJ08 株、LX 株、YN02 株免疫鸡后不能完全抵抗其他系列流行毒株的攻击,免
疫效果较差,而均可以抵抗同系列流行毒株的攻击,可以给鸡群良好的免疫保护。
针对单一毒株制备的疫苗很难抵抗多系列毒株攻击的情况,实验室试制三批禽流感
(H9 亚型)三价灭活疫苗,进行三价灭活疫苗的交叉保护情况、免疫期及安全性等相关
试验,为研制 H9 亚型多价苗进行探索。结果显示三价灭活疫苗免疫 SPF 鸡免后 3 个月
攻毒病毒分离率为 0,5 个月攻毒病毒分离率 10﹪~20﹪,非免疫对照鸡攻毒病毒分离
率均为 100﹪。蛋鸡免后 8 个月,H9 HI 效价保持较好的水平(6.3log2),攻毒后精神、
食欲和产蛋均正常,产蛋性能没有出现大的波动。疫苗免疫后检测抗体水平结果显示,
SPF 鸡免后 20 周(约 4.5 个月)、商品雏鸡免后 16 周(约 3.5 个月)、蛋鸡免后 26 周(约
6 个月)HI 抗体>7log2。
关键词:H9N2 禽流感;抗原性;免疫原性
目录
英文缩略表....Ⅶ
中文摘要……..1
英文摘要……..3
前言…..5
1.流感病毒的病原学…..…….5
1.1 禽流感病毒基因组...…….6
1.2 血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白的功能及与其有关的病毒特性……..…..….6
1.3 禽流感病毒的变异...…....10
1.4 H9N2 AIV 的分子演化……...……...…..11
2 .H9 亚型禽流感病毒的流行病学及临床剖检症状.…......11
3.流感病毒的疫苗免疫……..…...…13
3.1 全病毒灭活疫苗…….......14
3.2 弱毒疫苗…...……14
3.3 亚单位疫苗…...…15
3.4 重组活载体疫苗.…..……16
3.5 核酸疫苗……...…16
4.本研究的目的意义及拟解决的问题...……...…...17
试验一、H9N2 亚型禽流感病毒流行特点…..……18
1.材料与方法…..…...18
1.1 病毒..…...18
1.2 引物…..…20
1.3 主要仪器….…....20
1.4 主要试剂……..…20
1.5 病毒基因组 RNA 的提取….……..…....20
1.6 RT-PCR…...….…20
1.7 测序…...….….…21
1.8 序列分析……..….…..……..…..21
2.试验结果.….……...22
2.1 PCR 检测结果….…..…..22
2.2 序列测定结果……..…...22
2.3 HA 基因系统发育进化树…..….23
2.4 禽流感病毒分离株核苷酸序列同源性比较...…...…...25
3.小结…….….……...25
3.1 H9N2 亚型禽流感毒株遗传进化关系分析……..…….25
试验二、H9N2 亚型禽流感病毒 HA 基因序列同源性差异与病毒抗原性差异的比较研究….29
1.材料与方法…….....30
1.1 免疫用毒株的选取..…...30
1.2 不同毒株免疫血清的制备….....31
1.3 微量血凝抑制试验…….31
1.4 交叉血凝抑制试验…….….…...32
1.5 鸡胚交叉中和试验(固定病毒-血清稀释法)…...…….…….....32
2.结果……...32
2.1 交叉血凝抑制试验结果…….....32
2.2 鸡胚交叉中和试验结果.33
2.3 HA 基因核苷酸序列差异与抗原性差异相关性的分析…..….35
2.3.1 HA 基因核苷酸序列差异小于 4%即同系列毒株间的抗原相关性……..……...….35
2.3.2 HA 基因核苷酸序列差异大于 4%即不同系列毒株间的抗原相关性…..…35
3.讨论…..…...36
3.1 HA 基因核苷酸序列差异与抗原性差异的比较分析...36
3.2 H9N2 禽流感病毒不同分离株间的抗原性差异分析……..….37
试验三、H9N2 亚型禽流感地方分离株疫苗免疫保护试验及免疫效果调查.…38
1.材料与方法…….....38
1.1 材料..…...38
1.2 方法..…...39
1.2.1 灭活疫苗的制备...........39
1.2.2 高免血清的制备及交叉血凝抑制试验…...……...…39
1.2.3 不同毒株间的攻毒保护试验…..……39
1.2.4 试制禽流感(H9 亚型)三价灭活疫苗效力试验…….……39
1.2.5 试制禽流感(H9 亚型)三价灭活疫苗安全性试验…….....40
2.试验结果.....42
2.1 疫苗及高免血清的制备…….....42
2.2 交叉血凝抑制结果..…...42
2.3 攻毒后病毒分离率….....43
2.4 禽流感(H9 亚型)三价灭活疫苗效力试验结果……..…….44
2.5 禽流感(H9 亚型)三价灭活疫苗安全性试验结果……..…..47
3.讨论…….....49
结论.…….…..51
参考文献..…..52
致 谢……..…57
资料文件预览
共1文件夹,1个文件,文件总大小:2.65MB,压缩后大小:1.05MB
  • 硕士论文-H9N2亚型禽流感灭活疫苗研究
    • Microsoft Word文档硕士论文-H9N2亚型禽流感灭活疫苗研究.doc  [2.65MB]
下载地址
资料评论
注意事项
下载FAQ:
Q: 为什么我下载的文件打不开?
A: 本站所有资源如无特殊说明,解压密码都是www.xuehai.net,如果无法解压,请下载最新的WinRAR软件。
Q: 我的学海币不多了,如何获取学海币?
A: 上传优质资源可以获取学海币,详细见学海币规则
Q: 为什么我下载不了,但学海币却被扣了?
A: 由于下载人数众多,下载服务器做了并发的限制。请稍后再试,48小时内多次下载不会重复扣学海币。
下载本文件意味着您已经同意遵守以下协议
1. 文件的所有权益归上传用户所有。
2. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
3. 学海网仅提供交流平台,并不能对任何下载内容负责。
4. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
5. 本站不保证提供的下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
返回顶部