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  • 资源分类:生物农医
  • 适用专业:应用化学
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资料简介
硕士论文-苹果副产品中根皮素和根皮苷的高速逆流色谱分离纯化技术研究,共79页,31322字
摘 要
根皮素和根皮苷是存在于苹果等水果果实及其根皮中的天然活性物质,是苹果多酚
的重要组成部分,属于黄酮类化合物。根皮素和根皮苷均具有抗氧化、抗自由基等生理
活性。
采用溶剂法从苹果皮和苹果树皮中提取出根皮素和根皮苷粗产品。考察了浸提法、
微波萃取法、超声波法和加热回流法等提取方法,并利用高效液相色谱测定根皮素和根
皮苷的含量。结果表明,加热回流法在提取效果上具有明显的优势。从苹果果皮中提取
的根皮素和根皮苷的提取量远远低于从苹果树皮中的提取量。以苹果树皮为原料,通过
单因素和正交实验,获得提取根皮素的最佳工艺条件为:90%乙醇溶液、4mL 浓盐酸、
回流时间 120min、料液比 1:15、提取 3 次。提取量为 10.8mg/g,经乙酸乙酯萃取后,
粗产品中根皮素的含量为 5.72%;获得提取根皮苷的最佳工艺条件为:60%乙醇溶液、
回流 30min、料液比 1:20。提取量为 20.1mg/g,经乙酸乙酯萃取后,粗产品中根皮苷
的含量为 19.2%。
利用高速逆流色谱法分离纯化苹果树皮粗提物中的根皮素和根皮苷。纯化根皮素粗
提物的双相溶剂体系为正己烷:乙酸乙酯:乙醇:水 = 2:2:1:2(v/v),柱温为 10oC,
流动相流速为 2.0mL/min,转速为 850 r/min,使用同一溶剂体系分离两次,从 767.3mg
粗提物中制得 39.2mg 根皮素,提取率为 88.7%,纯度 为 98.2%。纯化根皮苷粗提物的双
相溶剂体系为氯仿:甲醇:正丁醇:水 = 5:4:0.5:3(v/v),柱温为 10oC,流动相流
速为 2.0mL/min,转速为 850 r/min。一次进样根皮苷粗提物 606.0mg,获得根皮苷纯品
89.5 mg,提取率 为 76.9%,纯度为 99.0%。提取的根皮素和根皮苷分别通过紫外、红外、
质谱、核磁共振氢谱和碳谱进行了结构确认。
关键词:根皮素;根皮苷;高速逆流色谱;纯化;苹果树皮;苹果皮
目录
中文摘要..…………… …………………1
英文摘要..…………… …………………2
前言..………………… …………………4
1 研究的目的、意义.. …………………4
1.1 多酚及黄酮类简介.…… ……………………………4
1.1.1 多酚类物质.. ……………………4
1.1.2 苹果中的多酚类物质.……………………………4
1.1.3 黄酮类化合物.. …………………5
1.1.4 黄酮类的应用价值及前景………………………………6
1.2 根皮素简介.……………………… .7
1.3 根皮苷简介.………………………… ………………………………8
2 根皮素及根皮苷提取纯化研究现状及逆流色谱技术 ………… ……… …… ………9
2.1 根皮素及根皮苷提取纯化研究现状………………… .……………9
2.2 逆流色谱技术简介.… .……………10
2.2.1 高速逆流色谱..…………………10
2.2.2 逆流色谱溶剂体系的选择..……10
2.2.3 逆流色谱的应用领域及发展趋势.………………………………11
3 函待解决的问题..……………………12
研究内容..………………………………13
1 苹果副产品中根皮素的提取优化..…13
1.1 苹果果皮中根皮素的提取优化.…………… ………………………13
1.1.1 实验仪器,试剂,材料..………13
1.1.2 实验方法..………………………13
1.1.2.1 色谱条件的确定..……………13
1.1.2.2 根皮素标准曲线的绘制..……15
1.1.2.3 苹果皮粗提液的制备..………15
1.1.2.4 根皮素的精提..………………15
1.1.2.5 不同浓度乙醇提取液的加热回流法提取.……………………16
1.1.3 实验结果..………………………16
1.1.3.1 根皮素粗提效果及影响因素..16
1.1.3.2 根皮素精提效果及影响因素..16
1.1.3.3 加热回流法精提效果及影响因素.……………………………17
1.1.3.4 小结..…………………………17
1.2 苹果树皮中根皮素的提取优化..…17
1.2.1 实验仪器,试剂,材料..………17
1.2.2 实验方法..………………………18
1.2.2.1 色谱条件的确定..……………18
1.2.2.2 根皮素标准曲线的绘制..……18
1.2.2.3 盐酸水解对根皮素提取效果的影响.…………………………19
1.2.2.4 树皮中根皮素的提取方法比较.………………………………19
1.2.2.5 回流法提取条件的单因素实验.………………………………19
1.2.2.6 回流法正交试验..……………19
1.2.3 实验结果与讨论..………………20
1.2.3.1 盐酸水解对根皮素提取的影响结果.…………………………20
1.2.3.2 四种溶剂法提取效果比较结果.………………………………20
1.2.3.3 回流法单因素实验结果..……21
1.2.3.4 回流法正交试验结果..………21
1.2.3.5 小结.……………………………… ……………………………22
2 苹果副产品中根皮苷的提取条件优化.………………………………23
2.1 苹果皮中根皮苷的提取优化.… .…23
2.1.1 实验仪器,试剂,材料..…………23
2.1.2 实验方法..………………………23
2.1.2.1 色谱条件的确定..……………23
2.1.2.2 根皮苷标准曲线的绘制..……24
2.1.2.3 根皮苷提取方法的正交实验..24
2.1.2.4 回流法提取根皮苷单因素实验.………………………………25
2.1.2.5 回流法提取根皮苷的正交实验.………………………………25
2.1.2.6 根皮苷稳定性测试..…………25
2.1.3 实验结果..………………………25
2.1.3.1 根皮苷提取方法的正交实验方案设计结果.…………………25
2.1.3.2 回流法提取根皮苷单因素实验.………………………………27
2.1.3.3 回流法提取根皮苷的正交实验.………………………………27
2.1.3.4 验证实验..……………………29
2.1.3.5 根皮苷稳定性测试..…………29
2.1.3.6 小结..…………………………29
2.2 苹果树皮中根皮苷的提取优化..…29
2.2.1 实验仪器,试剂,材料..………29
2.2.2 实验方法..………………………30
2.2.2.1 色谱条件的确定..……………30
2.2.2.2 根皮苷标准曲线的绘制..……30
2.2.2.3 提取条件的单因素实验..……31
2.2.3 实验结果..………………………31
2.2.3.1 根皮苷提取单因素实验结果..31
2.2.3.2 小结..…………………………33
3 根皮素的逆流色谱分离..……………33
3.1 实验仪器、试剂与样品制备..……33
3.1.1 实验仪器..…………………33
3.1.2 实验试剂 … … … … … … … … …34
3.1.3 实验样品的制备..………………34
3.2 逆流双相体系的优化..……………34
3.3 逆流提取的优化..…………………36
3.3.1 逆流色谱温度对分离的影响..…36
3.3.2 逆流色谱进样量对分离的影响..38
3.3.3 根皮素的逆流色谱分离..………38
3.4 结构鉴定..…………………………39
3.5 小结..………………………………40
4 根皮苷的逆流色谱分离..……………41
4.1 实验仪器与试剂 样品……………………… …… ……………… .41
4.1.1 实验仪器 … … … … … … …41
4.1.2 实验试剂 … … … …… … … …41
4.1.3 实验样品的制备……………………… …… ……………… .41
4.2 逆流双相体系的优化.……………………… ………………………42
4.3 逆流提取条件的优化.…………………… …………………………43
4.4 根皮苷的逆流色谱分离.……… .…44
4.5 结构鉴定.………………… .………45
4.6 小结.…………………… .…………47
结论...…48
参考文献..………………………………49
附图...…52
研究生期间发表文章..…………………65
致谢...…66
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